[发明专利]血管生成素富集的乳级分

权利要求书

1.一种从乳样品中获得血管生成素富集产品的方法，所述方法包括：

(a)将所述乳样品与一种与血管生成素相互作用的捕获剂接触，从而使所述乳样品中存在的血管生成素与所述捕获剂相互作用形成一种血管生成素-捕获剂复合物；

(b)将所述复合物从所述乳样品中分离出来；

(c)将血管生成素从所述复合物的捕获剂中释放出来；和

(d)收集步骤(c)的血管生成素，从而获得血管生成素富集产品。

2.权利要求1的方法，其中所述捕获剂固定于一种支持物。

3.权利要求1的方法，其中所述捕获剂是一种抗体。

4.一种从乳样品中获得血管生成素富集产品的方法，所述方法包括：

(a)将所述乳样品加至其上面固定有与血管生成素相互作用的抗体的支持物，其中所述乳样品中存在的血管生成素与所述支持物上的抗体相互作用形成一种血管生成素-抗体复合物；

(b)从所述支持物上洗去所述乳样品中存在的不与所述抗体相互作用的组分以将所述复合物从所述乳样品中分离出来；

(c)将血管生成素从所述复合物的抗体中释放出来；和

(d)收集步骤(c)的血管生成素，从而获得血管生成素富集产品。

5.一种从乳样品中获得血管生成素富集产品的方法，所述方法包括：

(a)将液相乳样品加至第二相，所述第二相使得可基于所述乳样品组分的尺寸分离组分；和

(b)收集与所述乳样品的其他组分分离的血管生成素，从而获得血管生成素富集产品，

其中在步骤(a)之前，不对所述乳样品进行凝乳或酸沉淀处理，或者所述乳样品不是乳清或乳清级分。

6.权利要求5的方法，其中所述第二相为半渗透相。

7.权利要求5的方法，其中所述半渗透相允许尺寸小于30kDa的组分作为渗透物通过所述半渗透相。

8.权利要求7的方法，其中血管生成素作为渗透物通过所述半渗透相。

9.权利要求5的方法，其中所述半渗透相允许尺寸小于10kDa的组分作为渗透物通过所述半渗透相。

10.权利要求9的方法，其中血管生成素作为保留物被所述半渗透相所保留。

11.权利要求5的方法，其中借助于由注射器、压缩气体、泵、离心力或其组合施加的力迫使所述乳样品通过所述半渗透相。

12.权利要求5的方法，其中所述第二相为半渗透膜。

13.一种从乳样品中获得血管生成素富集产品的方法，所述方法包括：

(a)将液相乳产品加至第二相，所述第二相使得可基于所述乳样品组分的尺寸将所述组分分离为级分；

(b)鉴定那些含有血管生成素的级分并收集所述级分以获得血管生成素富集产品。

14.权利要求13的方法，其中所述第二相为尺寸排阻树脂。

15.权利要求14的方法，其中所述树脂分离分子量为约10-20kDa的蛋白。

16.一种从乳样品中获得血管生成素富集产品的方法，所述方法包括：

(a)将电场在横于流动的水性乳样品的方向上施加于所述乳流；

(b)回收被施加所述电场的乳流级分；并

(c)鉴定那些血管生成素富集的级分并收集所述级分，从而获得血管生成素富集产品。

17.权利要求16的方法，在变性条件下进行。

18.权利要求16的方法，其中水性乳的流动在提供pH梯度的缓冲介质中进行。

19.权利要求18的方法，其中所述梯度在8-11的pH范围内。

20.前述权利要求任一项的方法，还包括对所述血管生成素富集产品进行一个或多个其他血管生成素富集步骤。

21.权利要求20的方法，其中所述一个或多个其他血管生成素富集步骤选自阳离子交换色谱法、电泳包括自由流动电泳、尺寸排阻色谱法和超滤。

22.前述权利要求任一项的方法，其中所述乳样品选自全乳、脱脂乳、酪乳、乳清、乳清级分和初乳。