[发明专利]针对CXCR4和其他GPCRs的氨基酸序列以及包含所述氨基酸序列的多肽

权利要求书

1.多肽，其包含一种或多种特异性结合人CXCR4(SEQ ID NO：254)的纳米抗体和可能包含一种或多种特异性结合血清蛋白的纳米抗体，

且其中所述一种或多种特异性结合人CXCR4的纳米抗体通过包括至少以下步骤的方法生成：

a)用有生命的并在其表面上表达人CXCR4的完整细胞免疫美洲驼；和

b)关于针对人CXCR4的结合进行选择；和任选地

c)在所述选择步骤中，仅使用缓冲液诸如无去污剂的PBS温和洗涤；

且其中

a)所述多肽在竞争结合测定中结合人CXCR4时，在高浓度下(≥100nM)替代超过50％，更优选60％，甚至更优选70％，甚至更优选80％，甚至更优选90％，最优选95％的人CXCL12(SEQ ID NO：267)，和/或

b)所述多肽在等于或低于100nM，更优选10nM，更优选1nM和最优选0.1nM的浓度下，完全拮抗人CXCL12对人CXCR4的趋化作用；

并且其中如果所述多肽包含两种或更多种纳米抗体，则所述多肽任选还包含一个或更多肽接头。

2.权利要求1所述的多肽，其包含两种或更多种特异性结合人CXCR4的纳米抗体。

3.权利要求1或2所述的多肽，其包含两种特异性结合人CXCR4的纳米抗体。

4.权利要求1、2或3所述的多肽；其中至少一种纳米抗体基本上由4个构架区(分别为FR1-FR4)和3个互补性决定区(分别为CDR1-CDR3)组成，其中CDR1选自由下列各项组成的组：

a)SEQ ID NO’s：142-143的氨基酸序列；

b)与SEQ ID NO’s：142-143的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

c)与SEQ ID NO’s：142-143的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列；

且

-CDR2选自由下列各项组成的组：

d)SEQ ID NO’s：174-175的氨基酸序列；

e)与SEQ ID NO’s：174-175的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

f)与SEQ ID NO’s：174-175的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列；

且

-CDR3选自由下列各项组成的组：

g)SEQ ID NO’s：206-207的氨基酸序列；

h)与SEQ ID NO’s：206-207的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

i)与SEQ ID NO’s：206-207的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列。

5.权利要求1、2、3或4的多肽；其中所述两种特异性结合人CXCR4的纳米抗体基本上由4个构架区(分别为FR1-FR4)和3个互补性决定区(分别为CDR1-CDR3)组成，其中CDR1选自由下列各项组成的组：

a)SEQ ID NO’s：142-143的氨基酸序列；

b)与SEQ ID NO’s：142-143的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

c)与SEQ ID NO’s：142-143的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列；

且

-CDR2选自由下列各项组成的组：

d)SEQ ID NO’s：174-175的氨基酸序列；

e)与SEQ ID NO’s：174-175的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

f)与SEQ ID NO’s：174-175的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列；

且

-CDR3选自由下列各项组成的组：

g)SEQ ID NO’s：206-207的氨基酸序列；

h)与SEQ ID NO’s：206-207的至少一个氨基酸序列具有至少80％的氨基酸同一性的氨基酸序列；

i)与SEQ ID NO’s：206-207的至少一个氨基酸序列具有3，2，或1个氨基酸差异的氨基酸序列。