[发明专利]用于对细胞进行空间分割以及筛选的组合物以及方法

权利要求书

1.一种用以实现溶液相的生物分子的筛选的方法，包括：

将一种细胞文库沉积在一种微型装置之上，其中在所述的微型装置中含有能够对存在于溶液之中的所述细胞进行空间上的分割的孔，其中所述的细胞以大约每孔一个细胞的水平被进行了分配，其中大量的细胞能够在所述的溶液中分泌至少一种生物分子的变体；

将所述的经过分泌的生物分子变体与至少一种光学信号底物进行接触，每一种代表着一种期望的生物分子的表型或者活性；

以多种参数为基础，对由所述的细胞编码的所述生物分子所具有的表型进行评价，并且

将所述的细胞从所述的微型装置中分离出来，其中所述的细胞分泌出一种期望的生物分子变体。

2.根据权利要求1中所述的方法，其中通过下述方式对所述的表型进行评价：对一种或者多种光学信号随时间的变化进行探测，其中所述的光学信号是由存在于所述的细胞文库之中的一种或者多种光学信号底物产生的，其中这样的变化代表着所述的生物分子的变体所具有的期望的生物分子表型或者活性。

3.根据权利要求2中所述的方法，其中所述的光学信号是一种荧光性的信号。

4.根据权利要求3中所述的方法，其中在所述的微型装置中以实时的方式或者近似于实时的方式对所述的生物分子的表型或者活性进行监测，其中所述的监测是以所述的荧光性信号所具有的强度所发生的变化为基础的。

5.根据权利要求1中所述的方法，其中所述的生物分子选自由下述所组成的组中：肽，多肽，蛋白酶，氧化还原酶，转移酶，水解酶，裂解酶，异构酶，连接酶，酶，抗体，细胞因子，趋化因子，核酸，代谢产物，小分子(小于1千道尔顿)以及合成分子。

6.根据权利要求5中所述的方法，其中所述的生物分子所具有的分子量超过大约600道尔顿并且小于大约100000道尔顿。

7.根据权利要求1中所述的方法，其中所述的参数选自由下述参数所组成的组中：催化速率，反应的特异性，动力学有效性，以及底物的结合亲和性。

8.根据权利要求7中所述的方法，其中所述的参数是以平行的方式被进行评价的。

9.根据权利要求1中所述的方法，其中所述的细胞是真核细胞。

10.根据权利要求9中所述的方法，其中所述的真核细胞是酵母细胞。

11.根据权利要求1中所述的方法，其中所述的细胞具有存在于大约10微米至100微米之间的直径。

12.根据权利要求1中所述的方法，其中通过利用一种玻璃毛细管的显微操作技术对所述的细胞进行分离。

13.根据权利要求12中所述的方法，其中进一步的包括对所述的生物分子进行随机突变的步骤。

14.根据权利要求12中所述的方法，其中进一步的包括对所述的生物分子进行测序的步骤。

15.根据权利要求1中所述的方法，其中所述的生物分子是一种突变的糖基转移酶(GTase)或者是一种糖苷酶。

16.根据权利要求15中所述的方法，其中所述的糖基转移酶能够与化学合成方法进行竞争，用以对复杂的碳水化合物进行快速并且大规模的生产。