[发明专利]具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸

权利要求书

1.一种具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的分离的多肽，其选自下组：

(a)包含与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少65％同一性的氨基酸序列的多肽；

(b)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在至少中等严格条件下与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列或其全长互补链杂交；

(c)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有至少65％同一性的核苷酸序列；和

(d)包含取代、缺失和/或插入一个或多个(数个)氨基酸的SEQ ID NO：2的成熟多肽的变体。

2.权利要求1的多肽，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列或其具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的片段，或由SEQ ID NO：2的氨基酸序列或其具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的片段组成。

3.权利要求1的多肽，其由包含于质粒pHinsGH67A中的多核苷酸编码，所述质粒pHinsGH67A包含于大肠杆菌NRRL B-50155中。

4.一种分离的多核苷酸，其包含编码权利要求1-3任一项所述的多肽的核苷酸序列。

5.一种重组宿主细胞，其包含权利要求4的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个(数个)调控序列，所述调控序列指导具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽的产生。

6.一种产生权利要求1-3任一项所述多肽的方法，包括：(a)在有助于该多肽产生的条件下培养细胞，所述细胞以其野生型形式产生该多肽；和(b)回收所述多肽。

7.一种产生权利要求1-3任一项所述多肽的方法，包括：(a)在有助于该多肽产生的条件下培养包含核酸构建体的宿主细胞，所述核酸构建体包含编码该多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

8.一种产生亲本细胞突变体的方法，包括破坏或缺失编码权利要求1-3任一项所述多肽的多核苷酸或其部分，其导致所述突变体与所述亲本细胞相比产生较少的该多肽。

9.一种产生权利要求1-3任一项所述多肽的方法，包括：(a)在有助于产生所述多肽的条件下培养转基因植物或植物细胞，所述转基因植物或植物细胞包含编码所述多肽的多核苷酸；和(b)回收所述多肽。

10.一种转基因植物、植物部分或植物细胞，其是用编码权利要求1-3任一项所述的多肽的多核苷酸转化的。

11.一种双链抑制性RNA(dsRNA)分子，其包含权利要求4的多核苷酸的亚序列，其中所述dsRNA任选地为siRNA或miRNA分子。

12.一种在细胞中抑制具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽表达的方法，包括对所述细胞施用或在所述细胞中表达双链RNA(dsRNA)分子，其中所述dsRNA包含权利要求4的多核苷酸的亚序列。

13.一种编码信号肽的分离的多核苷酸，所述信号肽包含SEQ ID NO：2的氨基酸1至15，或由SEQ ID NO：2的氨基酸1至15组成。

14.一种产生蛋白质的方法，包括：(a)在有助于所述蛋白质产生的条件下培养重组宿主细胞，所述细胞包含可操作地连接于权利要求13的多核苷酸的编码蛋白质的基因，其中所述基因对于所述多核苷酸是外源的；和(b)回收所述蛋白质。

15.一种降解或转化纤维素材料或含木聚糖材料的方法，包括：在权利要求1-3任一项所述的具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽存在下用酶组合物处理所述纤维素材料或含木聚糖材料。

16.权利要求15的方法，还包括回收降解的纤维素材料或含木聚糖材料。

17.一种产生发酵产物的方法，包括：

(a)在权利要求1-3任一项所述的具有α-葡糖醛酸糖苷酶活性的多肽存在下用酶组合物糖化纤维素材料或含木聚糖材料；

(b)用一种或多种发酵微生物发酵经糖化的纤维素材料或含木聚糖材料以产生所述发酵产物；和

(c)自所述发酵回收发酵产物。