[发明专利]产生抗体的非人哺乳动物

权利要求书

1.转基因非人哺乳动物，其至少在其B细胞谱系中包含编码至少免疫球蛋白轻链或者重链的核酸，其中所述重链或者轻链编码序列具有使其对于DNA重排和/或体细胞超突变有抗性的手段。

2.权利要求1的转基因非人哺乳动物，其是啮齿动物，优选小鼠。

3.权利要求1-2任一项的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链/重链编码序列整合在所述非人哺乳动物的基因组中。

4.权利要求3的转基因非人哺乳动物，其中所述整合位于对沉默具有抗性的基因座中。

5.权利要求4的转基因非人哺乳动物，其中所述整合位于Rosa-基因座中。

6.权利要求1-5任一项的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码核酸具有使得所述核酸的表达基本限于B细胞谱系的细胞的手段。

7.权利要求6的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码核酸具有使得所述轻链编码核酸的表达在B细胞发育的一定阶段占主导地位的手段。

8.权利要求7的转基因非人哺乳动物，其中所述手段包含选自CD19、CD20、μHC、VpreB1、VpreB2、VpreB3、λ5、Igα、Igβ、κLC、λLC和BSAP(Pax5)的启动子。

9.权利要求7或8的转基因非人哺乳动物，其中所述手段包含cre-lox系统等。

10.权利要求1-9任一项的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码序列编码能与所述非人哺乳动物编码的至少两个不同重链配对的轻链。

11.权利要求1-10任一项的转基因非人哺乳动物，其中编码内源轻链的至少一个内源基因座是功能性沉默的。

12.权利要求1-11任一项的转基因非人哺乳动物，其中内源κ轻链是功能性沉默的。

13.权利要求1-12任一项的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码序列的序列是人vκ序列。

14.权利要求13的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码序列是种系样序列。

15.权利要求14的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码序列是种系序列。

16.权利要求15的转基因非人哺乳动物，其中所述种系序列基于O12。

17.权利要求1的转基因非人哺乳动物，其中所述轻链编码核酸从5’-3’方向包含：vκ启动子，人前导序列，人V基因，任选存在的MoEκi增强子，大鼠恒定区(κ)，及任选存在的(截短的)MoEκ3’增强子。

18.转基因非人动物，其具有在细胞发育成成熟B细胞的一定阶段期间在细胞中表达希望的蛋白质样分子的表达盒，所述表达盒包含：

防止在导入宿主细胞中之后希望的蛋白质样分子表达沉默的手段，及

在宿主细胞希望的发育阶段定时表达希望的蛋白质样分子的手段。

19.具有权利要求18的表达盒的转基因非人动物，其中所述定时表达的手段是其活性基本限于发育一定阶段的启动子。

20.具有权利要求18或19的表达盒的转基因非人动物，其中所述一定阶段起自所述细胞在发育为成熟B细胞的一定阶段即将发生轻链分子表达之前或者与发生轻链分子表达相同的阶段。

21.具有权利要求19或20的表达盒的转基因非人动物，其中所述启动子选自CD19启动子、Ig-α启动子、Ig-β启动子、μhc启动子、vk启动子，或者其类似物和/或同源物。

22.具有权利要求19-21任一项的表达盒的转基因非人动物，其中所述启动子驱动cre-样蛋白质的表达。

23.具有权利要求22的表达盒的转基因非人动物，其中编码希望的蛋白质样分子的序列通过所述cre-样蛋白质的作用而被激活。

24.具有一组作为表达盒的核酸的转基因非人动物，其中一个核酸包含权利要求22的表达盒，第二个核酸包含编码希望的蛋白质样分子的序列，所述序列在组成型启动子的控制下，所述启动子可以通过cre-样蛋白质的作用而被激活。