[发明专利]植物中提高的蛋白质产量和贮存

权利要求书

1.一种转基因双子叶植物，其包含：

a.一种或多种种子贮藏蛋白的缺乏，其中所述缺乏导致内源种子贮藏蛋白相对于野生型植物的所述贮藏蛋白减少至少50％；和

b.异源多核苷酸，其包含种子贮藏蛋白启动子、开放阅读框，所述开放阅读框包含ER信号序列、期望的蛋白质编码序列和ER滞留信号；其中所述开放阅读框可操作地连接至所述种子贮藏蛋白启动子；和

其中所述转基因植物的种子能够以大于5％的种子总干重的水平产生异源蛋白质。

2.权利要求1的双子叶植物，其中所述异源多核苷酸还包含5′翻译增强子结构域和/或3′翻译增强子结构域。

3.权利要求1的双子叶植物，其中所述ER滞留序列诱导异源蛋白质在ER或ER衍生的小泡的腔中积累。

4.权利要求1的双子叶植物，其中所述双子叶植物是豆科，和任选地豆目，和任选地大豆属(soya genus)的成员。

5.权利要求4的双子叶植物，其中所述双子叶植物是大豆属(Glycine genus)的成员。

6.权利要求5的双子叶植物，其中所述双子叶植物是大豆。

7.权利要求1的双子叶植物，其中所述启动子源自Kunitz胰蛋白酶抑制剂、大豆凝集素、免疫显性大豆变应原P34或Gly m Bd 30k、葡萄糖结合蛋白、种子成熟蛋白、大豆球蛋白或伴大豆球蛋白。

8.权利要求2的双子叶植物，其中所述翻译增强子结构域源自Kunitz胰蛋白酶抑制剂、大豆凝集素、免疫显性大豆变应原P34或Gly mBd 30k、葡萄糖结合蛋白、种子成熟蛋白、大豆球蛋白或伴大豆球蛋白。

9.权利要求1的双子叶植物，其中缺乏的贮藏蛋白是Kunitz胰蛋白酶抑制剂、大豆凝集素、免疫显性大豆变应原P34或Gly m Bd 30k、葡萄糖结合蛋白、种子成熟蛋白、大豆球蛋白或伴大豆球蛋白中的一种或多种。

10.权利要求9的双子叶植物，其中所述双子叶植物种子具有种子内源贮藏蛋白的多于75％的缺乏。

11.权利要求1的双子叶植物，其还包含5′翻译增强子结构域和3′翻译增强子结构域，并且其中所述启动子以及所述3′和5′翻译增强子结构域源自相同的贮藏蛋白。

12.权利要求1的双子叶植物，其中所述异源蛋白质在双子叶植物的种子中积累至大于大约2％或大于大约4％或大于大约5％的种子总干重的水平。

13.权利要求1的双子叶植物的种子。

14.获自权利要求13的种子的转基因蛋白质。

15.权利要求14的转基因蛋白质，其中所述异源蛋白质已被纯化。

16.权利要求1的双子叶植物，其中靶蛋白编码序列编码酶或其片段。

17.权利要求16的双子叶植物，其中所述酶是纤维素分解酶。

18.权利要求17的双子叶植物，其中所述纤维素分解酶源自真菌来源、细菌来源、动物来源或植物来源。

19.权利要求17的双子叶植物，其中所述纤维素分解酶是β-葡糖苷酶、外切葡聚糖酶1、外切葡聚糖酶II、内切葡聚糖酶、木聚糖酶、半纤维素酶、木质酶、木质素过氧化物酶或锰过氧化物酶。

20.包含权利要求14的蛋白质的产物。

21.包含权利要求14的蛋白质的商业上有用的酶组合物。

22.权利要求1的双子叶植物，其中所述一种或多种种子贮藏蛋白的缺乏由编码种子贮藏蛋白的核酸的RNAi、反义或有义片段的存在而引起。

23.一种转基因双子叶植物，其包含：

a.一种或多种内源植物贮藏蛋白的缺乏，其中所述缺乏导致所述内源植物贮藏蛋白相对于野生型植物减少至少50％；和

b.异源多核苷酸，其包含可操作地连接至开放阅读框的补偿蛋白的基因调控区，所述开放阅读框编码包含ER信号序列、期望的蛋白质编码序列和ER滞留信号的序列；

其中所述转基因双子叶植物的种子能够以大于5％的种子总干重的水平产生异源蛋白质。