[发明专利]用于检测结核分枝杆菌感染的方法

权利要求书

1.一种用于检测人类对象中结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的方法，其包含：

从来自疑似患有结核病的人类儿童或来自疑似具有结核分枝杆菌潜伏感染的人类对象的生物样品分离CD8+T细胞；以及

将CD8+T细胞与一种或多种分枝杆菌多肽相接触；

确定CD8+T细胞是否特异性识别分枝杆菌多肽，其中特异性识别分枝杆菌多肽的T细胞的存在检测出对象中的结核分枝杆菌，从而将儿童鉴定为患有结核病，或将对象鉴定为具有结核分枝杆菌潜伏感染。

2.权利要求1的方法，其中儿童的年龄小于5岁，或其中儿童的年龄是5到10岁。

3.权利要求1的方法，其中儿童是婴儿。

4.权利要求1的方法，其中对象疑似具有结核分枝杆菌潜伏感染。

5.权利要求1的方法，其中儿童疑似患有肺结核病。

6.权利要求1到4任一项的方法，其中对象或儿童疑似具有结核分枝杆菌的肺外感染。

7.权利要求6的方法，其中肺外感染包括淋巴结炎、胸膜结核、骨和关节结核、中枢神经系统结核、腹部结核、粟粒性结核或结核性心包炎。

8.权利要求6-7任一项的方法，其中对象是青春期前的少年。

9.权利要求1-8任一项的方法，其中确定CD8+T细胞是否特异性识别分枝杆菌多肽包含测量细胞因子的表达。

10.权利要求9的方法，其中细胞因子是干扰素-γ(IFN-γ)。

11.权利要求10的方法，其中测量IFN-γ的表达使用特异性结合IFN-γ的抗体进行测定。

12.权利要求1-11任一项的方法，其中所述一种或多种分枝杆菌多肽包含下列所显示的氨基酸序列：

(a)SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：39或SEQ ID NO：61所显示的氨基酸序列之一；或

(b)SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：7、SEQ IDNO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：39或SEQ ID NO：61所显示的至少一个氨基酸序列的至少9到20个连续的氨基酸，其中所述9到20个连续的氨基酸特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)；以及

(c)SEQ ID NO：39-83所显示的氨基酸序列之一。

13.权利要求1-11任一项的方法，其中分枝杆菌多肽包含SEQ IDNO：39所显示的氨基酸序列。

14.权利要求1-11任一项的方法，其中分枝杆菌多肽包含SEQ IDNO：61所显示的氨基酸序列。

15.权利要求1-11任一项的方法，其中分枝杆菌多肽包含SEQ IDNO：39所显示的氨基酸序列特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)的9到20个连续氨基酸。

16.权利要求1-11任一项的方法，其中分枝杆菌多肽包含SEQ IDNO：61所显示的氨基酸序列特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)的9到20个连续氨基酸。

17.权利要求1-16任一项的方法，其中生物样品是血液、分离的外周血单核细胞、分离的单核细胞、痰液、肺活检样本、淋巴结活检样本、唾液、脑脊液或分离的CD3⁺T细胞。

18.权利要求1-16任一项的方法，其中将CD8⁺T细胞在体外与分枝杆菌多肽共同培养。

19.权利要求1-18任一项的方法，其还包括检测针对结核分枝杆菌的迟发型超敏反应。