[发明专利]识别天然的膜联蛋白A3的新抗体

说明书

【技术领域】

本发明涉及识别天然的膜联蛋白A3的新抗体。这些抗体适宜于诊断性及治疗性应用。

【背景技术】

之前的研究显示，ANXA3显著相关于前列腺疾病及前列腺癌的进展及各阶段。尚且，对人前列腺中ANXA3的作用及生物学知之甚少。迄今已显示，ANXA3所谓的外来体的部分，从各种上皮释放的小囊泡。有迹象表明此现象(其是ANXA3的诊断性表现的基础)是由于前列腺癌中自身免疫的复杂的调节。

用于治疗或诊断前列腺癌及其他泌尿生殖道上皮癌的蛋白生物标记描述于US 2005 130 876，WO 03 086 461，WO 2005 078 124，EP 05011 042.8及EP 05 026 092.6。将这些文献的内容通过引用并入本文。

US 60/812,089及US 60/859,489公开了癌的诊断，其中用高度特异性单克隆抗体分析样品中膜联蛋白A3的存在和/或量。将这些文献的内容通过引用并入本文。

尽管ANXA3已知为前列腺癌的标记物，及有关组织切片中良性，恶变前及恶性病情之间的差异诊断的方法的特异性抗体可用，但通过这些抗体测量尿及压出尿中的ANXA3遇到惊人的困难。

尿中″天然的″ANXA3的构象使得目前可用的在蛋白印迹或组织染色中高度特异性的抗体仅检测蛋白级分。此可能是由于外来体/前列腺小体中ANXA3的折叠导致对于特异性蛋白识别重要的表位非-接近性。已探究这些表位及详细描述于之前专利申请。

【发明内容】

本研究的目的旨在研究体液(例如尿及压出尿)中天然的ANXA3的定量丰度。

本发明发现使用之前描述的具有预后关联性的抗ANXA3-抗体的尿中ANXA3的有效检测仅在采用变性条件及蛋白印迹技术中才可能。无这些之前描述的抗体在基于ELISA的测试中工作良好，其中压出尿在″天然的″条件下测试。

意外地，我们接着组成ANXA3的完全特异性″抗体-反应性表面″及之前描述的表位，发现，在尿，压出尿及其他体液(如血浆或血清)中识别″天然的″ANXA3的抗体具有特异性识别天然的ANXA3的额外的表位。

在第一方面，本发明涉及识别天然的膜联蛋白A3(尤其是天然的人膜联蛋白A3)的抗体。这些抗体能在非-变性条件下(即在体液(例如尿及压出尿)中)与ANXA3特异性结合。

在第一优选的实施方式中，本发明涉及识别天然的膜联蛋白A3的抗体，其针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列59～67中的表位：EYQAAYGKE(SEQ ID NO：1)，或所述抗体的抗原-结合片段。

所述抗体之特定例选自：

(i)抗体

●TGC42、

●TGC43、或

●TGC49，

(ii)与来自(i)的抗体具有相同的抗原结合位点的抗体，及

(iii)所述抗体的抗原-结合片段。

还优选的实施方式涉及识别天然的膜联蛋白A3的抗体，其针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列1～106中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。

例如，此抗体可针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列1～34中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。或者，此抗体可针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列35～106中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。

所述抗体的特定例选自：

(i)抗体

●TGC44、或

●TGC48，

(ii)与来自(i)的抗体具有相同的抗原-结合位点的抗体，及

(iii)所述抗体的抗原-结合片段。

在又一实施方式中，本发明的抗体选自：

(i)抗体TGC42，TGC43，TGC44，TGC45，TGC46，TGC47，TGC48或TGC49，

(ii)与来自(i)的抗体具有相同的结合位点的抗体，及

(iii)与来自(i)或(ii)的抗体识别天然的人膜联蛋白A3上相同的表位的抗体，及

(iv)所述抗体的抗原-结合片段。