[发明专利]依靠转基因表达开花时间控制基因FT的甜菜同系物来工程化改造糖用甜菜中的抽苔抗性有效
申请号: | 200980138369.6 | 申请日: | 2009-09-01 |
公开(公告)号: | CN102171347A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
发明(设计)人: | 彼得罗内尔拉.M.范罗根;约翰尼斯.J.L.吉伦;皮埃尔.平;西格尼.I.E.雷默特韦克 | 申请(专利权)人: | 先正达参股股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 依靠 转基因 表达 开花 时间 控制 基因 ft 甜菜 同系物 工程 改造 中的 抽苔 抗性 | ||
1.一种核酸序列,优选地,一种分离的核酸分子,其:
a)与如下的核酸序列或其互补物具有至少70%的序列同一性;或
b)包含如下的核酸序列或其互补物的至少15个连续的核苷酸;或
c)在严格条件下与如下的核酸序列或其互补物杂交,
所述核酸序列选自下组:如SEQ ID NO:5、6、8、或9之任一项中所列的核酸序列。
2.依照权利要求1的核酸序列,其中所述核酸序列包含如SEQ ID NO:5、6、8、或9之任一项中所列的核酸序列。
3.多肽,优选地,一种分离的多肽,其由依照权利要求1或2的核酸序列编码。
4.依照权利要求3的多肽,其具有选自如SEQ ID NO:7或10中所描述的氨基酸序列的氨基酸序列。
5.嵌合构建体,其包含在调节元件控制下,优选地在植物中有功能的调节元件控制下的依照权利要求1或2的核酸序列。
6.依照权利要求5的嵌合构建体,其进一步包含选择标志基因,其容许在选择过程中区分经转化的和未转化的植物材料。
7.依照权利要求5或6的嵌合构建体,其中提供所述嵌合构建体
a)以在糖用甜菜中转基因下调或抑制所述内源BvFT2基因的表达;或
b)以在糖用甜菜中转基因上调所述内源BvFTl基因的表达。
8.依照权利要求7的嵌合构建体,其用于转基因下调或抑制所述内源BvFT2基因的表达,其中所述下调或抑制是通过选自下组的手段来实现的:
a)dsRNA;
b)反义抑制;或
c)共抑制。
9.依照权利要求8的嵌合构建体,其中所述嵌合构建体包含异源DNA,其编码第一RNA链和第二RNA链,而且在转录时产生第一RNA核苷酸序列和第二RNA核苷酸序列,其中所述第一RNA链与糖用甜菜中的所述内源BvFT2基因的RNA链的至少部分充分互补以与由所述内源BvFT2基因所生成的RNA链杂交或退火,从而引起对所述内源BvFT2基因表达的下调或抑制,且其中所述第一RNA核苷酸序列和所述第二RNA核苷酸序列形成双链RNA,其中糖用甜菜植物中表达后的所述双链RNA参与对所述内源BvFT2基因表达的RNA干扰,由此引起对所述内源BvFT2基因表达的下调或抑制。
10.依照权利要求9的嵌合构建体,其中所述嵌合构建体包含反向重复,优选地,与组成性启动子可操作连接的反向重复,其在转录时在包含所述第一和第二RNA链的所述糖用甜菜植物细胞中形成双链RNA分子,其中所述双链RNA分子触发BvFT2沉默。
11.依照权利要求9或10的嵌合构建体,其中所述异源DNA包含核酸序列,其
a)与如下的核酸序列具有至少70%的序列同一性;或
b)包含如下的核酸序列的至少15个连续的核苷酸;或
c)在严格条件下与如下的核酸序列杂交,
所述核酸序列是依照权利要求1或2的如SEQ ID NO:8或9所示的核酸序列。
12.依照权利要求11的嵌合构建体,其中所述嵌合构建体包含在PCR反应中自由BvFT2基因的外显子4组成的0.27Kb cDNA片段可获得的异源DNA,所述PCR反应使用具有核苷酸序列5’-CTATGGATCCGCATTTAATAAAA TCTCTTTCAATG-3’(SEQ ID NO:44)的正向引物HiNK6382和具有核苷酸序列5’-GTAGAAGCAGAAACTTACCTGCCAAGAAGTTGTCTGCTATG-3’(SEQ ID NO:45)的反向引物HiNK6384来进行。
13.依照权利要求12的嵌合构建体,其中所述嵌合构建体包含如SEQ ID NO:33的核苷酸8747至9046所描述的异源DNA。
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