[发明专利]细胞保存方法和细胞运输方法有效
申请号: | 200980142214.X | 申请日: | 2009-10-23 |
公开(公告)号: | CN102203241B | 公开(公告)日: | 2017-05-03 |
发明(设计)人: | 一丁田洋子;田崎刚;福田始弘;鹤田仁志;谷口英树 | 申请(专利权)人: | 可乐丽股份有限公司;公立大学法人横浜市立大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司72001 | 代理人: | 孙秀武,高旭轶 |
地址: | 日本冈山县*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 保存 方法 运输 | ||
1.细胞保存方法,其是使用具有多个微空间的细胞培养容器来保存肝细胞的细胞保存方法,
其中包括,
上述微空间通过微容器形成,
上述微容器的四边被侧壁完全地围住,
培养工序:使肝细胞粘附于上述多个微容器的表面进行培养,在各上述微容器内形成三维结构体,
保存准备工序:在上述培养后,除去非粘附细胞后将培养基向上述细胞培养容器注入并进行保存的准备,以覆盖上述多个微容器,
保存工序:将上述细胞培养容器密封,在维持上述三维结构体的状态下,以使培养基不漏出,保存上述肝细胞,
上述细胞培养容器保持在10℃以上且小于20℃的温度来保存上述肝细胞,
在上述培养工序中,各上述微容器内的上述三维结构体用上述侧壁与其他的上述三维结构体隔离,以使上述三维结构体与相邻的上述三维结构体不相接,
上述三维结构体是上述肝细胞集聚的球状细胞团。
2.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,进行上述培养,以使粘附于上述表面、且在各微空间的空间内形成的三维结构体的细胞群体形成被隔离的细胞数。
3.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,上述多个微空间的底部面积为0.01~0.1mm2,深度为25~150μm。
4.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,上述肝细胞的培养为,在使肝细胞粘附并进行培养后,进一步进行培养,使其增殖、铺展或者聚集。
5.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其中,以1×102~1×106细胞/cm2的细胞接种密度将肝细胞接种在上述多个微空间中。
6.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,上述细胞团的直径为30~200μm。
7.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,上述培养基含有血清、增殖因子和血中成分中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的细胞保存方法,其特征在于,使用使氧或二氧化碳透过的膜来密封上述细胞培养容器。
9.细胞运输方法,其是将肝细胞保存于具有多个微空间的细胞培养容器并运输的细胞运输方法,
其中包括,
上述微空间通过微容器形成,
上述微容器的四边被侧壁完全地围住,
培养工序:使肝细胞粘附于上述多个微容器的表面进行培养,在各上述微容器内形成三维结构体,
保存准备工序:上述培养后,除去非粘附细胞后将培养基向上述细胞培养容器注入并进行保存的准备,以覆盖上述多个微容器,
保存工序:将上述细胞培养容器密封,在维持上述三维结构体的状态下,以使培养基不漏出,保存上述肝细胞,
上述细胞培养容器保持在10℃以上且小于20℃的温度来保存上述肝细胞,
使用车辆、船舶或者航空器中的任一种运输装置将密封的上述细胞培养容器进行运输,
在上述培养工序中,各上述微容器内的上述三维结构体用上述侧壁与其他的上述三维结构体隔离,以使上述三维结构体与相邻的上述三维结构体不相接,
上述三维结构体是上述肝细胞集聚的球状细胞团。
10.根据权利要求2所述的细胞保存方法,其特征在于,上述多个微空间的底部面积为0.01~0.1mm2,深度为25~150μm。
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