[发明专利]作为人上皮细胞免疫刺激活性增强剂的抑瘤素M

说明书

发明领域

本发明的技术领域为免疫学。

发明背景

抑瘤素M(oncostatin M，OSM)为分子量大约为28,000的糖蛋白，它是主要由T细胞、单核细胞/巨噬细胞(Malik，1989)和树突状细胞(Suda等，2002)产生的IL-6类型的多效性细胞因子(IL-6是白细胞介素-6的缩写)。最初它从人白血病细胞中分离并通过其体外抑制黑色素瘤细胞生长的能力(Zarling等，1986；Brown等，1987)来鉴定。OSM促进宿主防御系统重要调节剂IL-6的产生(Brown等，1991)，以及急性期蛋白的表达(Heinrich，1998)。目前OSM被认为是涉及若干细胞类型诸如肝细胞、成骨细胞或肺上皮细胞的活化、增殖和分化(Grant等，1999；Tanaka等，2003)的多功能细胞因子，以及在炎症反应中发挥作用。

除了它对人A375黑色素瘤和小鼠M1髓样白血病细胞及作用于其他的实体肿瘤细胞的生长抑制活性之外(Grant等，1999；Gibbs等，1998)，OSM还具有对正常成纤维细胞、艾滋病-卡波西肉瘤(AIDS-Kaposi’s sarcoma)细胞和人红白血病细胞系TF-1(Nair等，1992；Miles等，1992)的生长刺激活性。结合OSM受体β亚基(OSMRβ)的抗体用于抑制癌细胞生长的用途已被要求保护(WO2006084092)。

还已知与α-干扰素组合的OSM具有抗病毒活性，特别是在抑制丙型肝炎病毒复制方面(EP1905447)。

在Zarling，et al.，1986中已确认了OSM作为炎症介质的角色。然而，它对免疫系统和其他的细胞因子的确切作用仍未清楚理解。而且，1997年前OSM受体信号系统在小鼠和人类间的差异(Ichihara等，1997)是未知的，这增加了表征OSM生物学活性的困惑。

在一方面，在Brown，et al.，1991中描述了OSM对内皮细胞的促炎性特性。在Yao et al.，1996中还报道了用人OSM刺激原代内皮培养物(人脐静脉内皮细胞HUVEC)导致P-选择素延迟但延长的上调，这促进白细胞迁入慢性或过敏性炎症区内。在另一方面，发现OSM降低抗体诱导的类风湿性关节炎模型中关节破坏的程度，这表明没有一致的免疫抑制的抗炎活性(Wallace等，1999)。在Hams，et al.，2008中推断OSMRβ信号传导在急性炎症期间限制单核细胞募集。然而最近的这两项研究都是在鼠科模型中进行的。

OSM在人体中通过两种不同的受体复合物进行信号传导：a)LIF/OSM共享的受体(LIF是白血病抑制因子的缩写)，其共享与LIF的高亲和力的结合，LIF是一种与OSM结构相似的进化相关蛋白；和b)独特地结合OSM的OSM特异性受体。然而，在小鼠中，OSM只通过该OSM-特异性受体的鼠科同源物传导信号。另外，已传统地用于小鼠体外和体内研究的人OSM只与鼠科的LIF受体结合，因此只显示了属于LIF而不是OSM的生物学活性(Bruce等，2000)。因此出于揭示在人体中具有临床应用的OSM的生物学活性的目的，正确设计的研究应该使用人细胞。

在EP422186中，描述了OSM在抑制内皮组织对辅助性T淋巴细胞和效应性T淋巴细胞免疫原性的作用，具有在器官移植和自身免疫性疾病治疗中的应用。

在Durda，et al.，2003中，OSM显示为黑色素细胞抗原表达的下调因子。然而，没有提供关于这种减弱的抗原表达对黑色素瘤细胞免疫反应作用的结论性数据。

在试图进一步地表征OSM在人体模型中的免疫学特性中，令人惊讶地发现OSM增强人肝细胞肝癌(HepG2)细胞刺激细胞毒性T细胞(CTL)产生干扰素-γ(IFN-γ)的能力，这比当仅使用α2-干扰素(IFNα2)时更有效。在细胞介导的免疫中，干扰素-γ是常用的抗原识别后T淋巴细胞激活的标志物(Brosterhus，et al.，1999)。本发现特别地揭示了OSM增加感染的或肿瘤上皮细胞的抗原性，即通过在这些细胞中增加抗原加工和呈递，而使得这些细胞更为明显且以导致同一细胞选择性破坏的自杀型机制应答免疫反应。

I型干扰素是具有细胞因子活性的多肽家族，其最初是借助于它们对体外细胞系病毒感染的抑制活性被发现的(Pestka等，2004)。