[发明专利]缺乏功能性II组荚膜基因簇的大肠埃希氏菌BL21菌株

权利要求书

1.一种大肠埃希氏菌（E. coli ）B BL21菌株，其特征在于具有不可逆失活的II组荚膜基因簇。

2.根据权利要求1的大肠埃希氏菌B BL21菌株，其特征在于具有II组荚膜基因簇的全部或部分缺失。

3.根据权利要求1的大肠埃希氏菌B BL21菌株，其特征在于具有II组荚膜基因簇的全部缺失。

4.根据任一前述权利要求的大肠埃希氏菌B BL21菌株，其中所述大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌B BL21（DE3）。

5.根据权利要求1-3任一项的大肠埃希氏菌菌株，其中所述大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌B BL21（DE3）?dadX?alr。

6.根据任一前述权利要求的大肠埃希氏菌B BL21菌株，其中所述菌株进一步包含具有插入的编码肽的DNA序列的表达载体。

7.根据任一前述权利要求的大肠埃希氏菌B BL21菌株，其中所述肽选自hGH、胰高血糖素样肽、白细胞介素、胰岛素类似物、野生型脂联素、FGF-21、胰蛋白酶、抑肽酶、支链淀粉和瘦蛋白及其类似物以及酶类，如唾液酸酶、转谷氨酰胺酶（tGase）、HRV（人类鼻病毒）3C蛋白酶、烟草蚀纹病毒（TEV）蛋白酶及其变体。

8.一种生产根据任一前述权利要求的大肠埃希氏菌B菌株的方法，其中所述II组荚膜基因簇采用包含下列步骤的方法被删除：

a. 使用选择标记替换II组荚膜基因簇，

b. 消除所述选择标记，并

c. 通过PCR分析确认删除。

9.根据权利要求8的生产大肠埃希氏菌B菌株的方法，其中所述选择标记为抗生素抗性基因。

10.根据权利要求9的生产大肠埃希氏菌B菌株的方法，其中所述抗生素抗性基因选自氯霉素、四环素、氨苄青霉素、卡那霉素、万古霉素和红霉素。

11.根据权利要求9的生产大肠埃希氏菌B菌株的方法，其中所述抗生素为氯霉素。

12.一种生产肽的方法，其包括在适当的培养基中培养根据权利要求1-7任一项的大肠埃希氏菌B 菌株，然后通过公知技术分离并纯化表达的肽。

13.根据权利要求12的方法，其中所述肽为hGH。

14.根据权利要求12的方法，其中所述肽为FGF-21。

15.根据权利要求12的方法，其中所述肽为支链淀粉。