[发明专利]具有细胞穿透性、序列特异性和核酸水解性的抗体、其制备方法及包含所述抗体的药物组合物

权利要求书

1.一种核酸水解性抗体，其能够渗透进入细胞并特异性结合特定碱基序列的单链或双链核酸靶标，且水解该靶标核酸。

2.根据权利要求1所述的核酸水解性抗体，其中靶标为G₁₈ 或Her2₁₈。

3.根据权利要求2所述的核酸水解性抗体，其中G₁₈具有SEQ ID NO：12的碱基序列。

4.根据权利要求2所述的核酸水解性抗体，其中Her2₁₈具有SEQ ID NO：13的碱基序列。

5.根据权利要求1所述的核酸水解性抗体，其中抗体具有从包括SEQ ID NOS：14 ~24氨基酸序列的组中选择的氨基酸序列。

6.根据权利要求5所述的核酸水解性抗体，其中抗体具有从包括SEQ ID NOS：25~35碱基序列的组中选择的碱基序列。

7.根据权利要求1所述的核酸水解性抗体，其中抗体选自下组中的一个：完整的IgG、重链可变区域的单结构域、轻链可变区域的单结构域、单链可变片段(scFv)、(scFv)₂、Fab、Fab'、F(ab')₂、双链抗体和dsFv及其组合。

8.一制备权利要求1中所述核酸水解性抗体的方法，包括：1）构建一没有底物特异性的细胞穿透性、核酸水解性抗体的模板的基因文库；2）通过使用表面显示载体在细胞表面表达步骤1）中构建的基因文库以生成蛋白质文库；3）从步骤2）中表达的蛋白质文库中选择能特异性结合特定碱基序列的核酸靶标的变体。

9.根据权利要求8所述的方法，其中没有底物特异性的细胞穿透性、核酸水解性抗体是从包括一完整的IgG，重链可变区域的单结构域，轻链可变区域的单结构域，单链可变片段(scFv)，(scFv)₂，Fab，Fab'，F(ab')₂，双链抗体和dsFv及其组合的组中选择的。

10.根据权利要求8所述的方法，其中没有底物特异性的细胞穿透性、核酸水解性抗体是3D8 VL 4M或其变体。

11.根据权利要求10所述的方法，其中3D8 VL 4M是以这样的方式突变的，包括c- (41~45位残基)，c'- (50~54位残基) 和f-β-链(90~94位残基)的3D8 VL 的DNA/RNA结合位点用NNB密码子（N=A/T/C/G，B=C/G/T）随机组合。

12.根据权利要求8所述的方法，其中步骤2）中的表面显示载体是从包括噬菌体显示载体、细菌显示载体、核糖体显示载体、RNA显示载体和酵母细胞显示载体及其组合的组中选择的。

13.据权利要求8所述的方法，其中步骤3）中的核酸靶标是内源性核酸或外源性核酸。

14..据权利要求13所述的方法，其中内源性核酸是编码在癌细胞中特异性过表达的蛋白质的核酸。

15.据权利要求13所述的方法，其中外源性核酸是病毒基因组核酸或编码病毒蛋白的核酸。

16.一种预防或治疗癌症的组合物，其包括权利要求1中所述的核酸水解性抗体作为活性成分。

17.一种预防或治疗病毒增殖的组合物，其包括权利要求1中所述的核酸水解性抗体作为活性成分。