[发明专利]治疗性核糖核酸酶

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求享有于2008年10月1日提交的美国临时专利申请序列号61/101,905的优先权，其全部公开内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及核糖核酸酶(RNA酶)在疾病的治疗或预防中的应用。

背景技术

在美国人口中，估计仅与15种最常见癌症类型相关的死亡率每年就为每100,000人中有接近170人死亡(Martin L Brown，Joseph Lipscomb和Claire Snyder，2001，THE BURDEN OF ILLNESS OF CANCER：Economic Cost and Quality of Life，Ann.Rev.Public Health，22：91-113)。目前，估计每年有1,437,180例新发癌症和565,650例死亡(American Cancer Society Cancer Facts and Figures 2008)。癌症的经济负担在1990年估计超过$960亿美元(Brown等人，2001)。

术语“化学疗法”仅指以化学物质治疗疾病。化学疗法之父Paul Ehrlich将完美的化学治疗剂设想为“魔术子弹”；这种化合物将杀死侵入的生物体或细胞而不伤害宿主。虽然在确认杀死或抑制癌细胞的化合物方面和确认将这种化合物指向所指定的靶标细胞的方法方面已经取得了显著进展，但本领域中还需要改善的治疗性化合物。

有多种不同类型的化学治疗剂可以使用，包括小分子和生物制剂，如核酸化合物、多肽化合物或其衍生物。通常，需要考虑的化学治疗剂的性质包括效能、药代动力学性质和制造的容易性。作为对小分子的替代性方案，蛋白治疗剂通常可提供特殊优点；不过，有效的蛋白药物必须具有包括以下的最佳性质的平衡：特异性、细胞毒性、对其靶标的亲和性、安全性、溶解性、有效递送的顺从性、稳定性和体内寿命(清除时间)。这些性质中任何一种性质优异的候选药物可能不具有作为有效药物的全部特征的最佳平衡。

本领域中需要具有用于治疗情况的有效补充特征的另外的抗癌化学治疗剂。

发明内容

本发明涉及RNA酶在疾病的治疗或预防中的应用。在一些实施方式中，RNA酶用于治疗或预防人类疾病，如癌症。在一些实施方式中，重组人RNA酶1的变体具有用于治疗或预防人癌症的所期望性质的最佳平衡。这些性质包括但不限于稳定性、对病原细胞的细胞毒性、降解包括病毒RNA在内的任何来源的病原RNA的效能、逃避被RNA酶抑制剂结合、对蛋白酶降解的抵抗性、向靶标细胞的递送、向细胞中输入的效率、剂量响应性、药代动力学性质和在人体内的寿命。在一些实施方式中，本发明的治疗性组合物和方法利用了人RNA酶1的变体，所述变体与野生型酶相比具有如下氨基酸变化：R4C、G38R、R39G、N67R、G89R、S90R和V118C。在一些实施方式中，核糖核酸酶包含SEQ ID NO：1或由SEQ ID NO：1组成，所述SEQ ID NO：1为：

KESCAKKFQRQHMDSDSSPSSSSTYCNQMMRRRNMTQRGCKPVNTFVHEPLVD

VQNVCFQEKVTCKRGQGNCYKSNSSMHITDCRLTNRRRYPNCAYRTSPKERHII

VACEGSPYVPCHFDASVEDST.

在一些实施方式中，所述氨基酸序列包含具有N-末端甲硫氨酸的SEQ ID NO：1(SEQ ID NO：4)或由具有N-末端甲硫氨酸的SEQ ID NO：1(SEQ ID NO：4)组成，所述具有N-末端甲硫氨酸的SEQ ID NO：1(SEQ ID NO：4)为：

MKESCAKKFQRQHMDSDSSPSSSSTYCNQMMRRRNMTQRGCKPVNTFVHEPLV

DVQNVCFQEKVTCKRGQGNCYKSNSSMHITDCRLTNRRRYPNCAYRTSPKERHI

IVACEGSPYVPCHFDASVEDST.

在一些实施方式中，核糖核酸酶重组生成。在一些实施方式中，核糖核酸酶由包含SEQ ID NO：2的核酸分子编码，所述SEQ ID NO：2为：

AAA GAA TCT TGC GCT AAA AAA TTC CAG CGT CAG CAC ATG GAC TCT GAC

TCT TCT CCG TCT TCT TCT TCT ACT TAC TGC AAC CAG ATG ATG CGT CGC