[发明专利]从脐带血有效增殖和分化自然杀伤细胞的方法无效

专利信息
申请号: 200980152697.1 申请日: 2009-09-28
公开(公告)号: CN102356154A 公开(公告)日: 2012-02-15
发明(设计)人: 崔仁杓;尹锡兰;李秀然;李周勇;林载升 申请(专利权)人: 株式会社美迪赛
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783
代理公司: 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 代理人: 张淑珍;梁兴龙
地址: 韩国*** 国省代码: 韩国;KR
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摘要:
搜索关键词: 脐带血 有效 增殖 分化 自然 杀伤 细胞 方法
【权利要求书】:

1.增殖NK细胞的方法,所述方法包括如下步骤:

1)通过将CD3阳性T细胞从脐带血源的单核细胞中清除,来制备CD3阴性细胞;和

2)在用细胞因子处理步骤1)的细胞后,培养所述CD3阴性细胞。

2.如权利要求1所述的增殖NK细胞的方法,其中,通过如下工艺进行步骤1)的制备:

通过使用CD3微珠,使CD3阳性细胞具有磁性;和

通过使用MACS柱分离CD3阴性细胞;或者在用荧光标记CD3阴性T细胞后,通过使用细胞分选仪分离CD3阴性细胞。

3.如权利要求1所述的增殖NK细胞的方法,其中,使用选自于由IL-2、IL-15和IL-21组成的组中的至少两种细胞因子一起进行步骤2)的细胞因子的处理。

4.如权利要求1所述的增殖NK细胞的方法,其中,步骤2)的细胞因子的处理是IL-15和IL-21的共处理。

5.分化NK细胞的方法,所述方法包括如下步骤:

1)通过将CD3阳性T细胞从脐带血源的单核细胞中清除,来制备CD3阴性细胞;和

2)在用细胞因子处理步骤1)的细胞后,培养所述CD3阴性细胞。

6.如权利要求5所述的分化NK细胞的方法,其中,通过如下工艺进行步骤1)的制备:

通过使用CD3微珠,使CD3阳性细胞具有磁性;和

通过使用MACS柱分离CD3阴性细胞;或者在用荧光标记CD3阴性T细胞后,通过使用细胞分选仪分离CD3阴性细胞。

7.如权利要求5所述的分化NK细胞的方法,其中,使用选自于由IL-2、IL-15和IL-21组成的组中的至少两种细胞因子一起进行步骤2)的细胞因子的处理。

8.如权利要求5所述的分化NK细胞的方法,其中,步骤2)的细胞因子的处理是IL-15和IL-21的共处理。

9.制备具有提高的细胞毒性的NK细胞的方法,所述方法包括如下步骤:

1)通过将CD3阳性T细胞从脐带血源的单核细胞中清除,来制备CD3阴性细胞;和

2)在用细胞因子处理步骤1)的细胞后,培养所述CD3阴性细胞。

10.如权利要求9所述的制备具有提高的细胞毒性的NK细胞的方法,其中,通过如下工艺进行步骤1)的制备:

通过使用CD3微珠,使CD3阳性细胞具有磁性;和

通过使用MACS柱分离CD3阴性细胞;或者在用荧光标记CD3阴性T细胞后,通过使用细胞分选仪分离CD3阴性细胞。

11.如权利要求9所述的制备具有提高的细胞毒性的NK细胞的方法,其中,使用选自于由IL-2、IL-15和IL-21组成的组中的至少两种细胞因子一起进行步骤2)的细胞因子的处理。

12.如权利要求9所述的制备具有提高的细胞毒性的NK细胞的方法,其中,步骤2)的细胞因子的处理是IL-15和IL-21的共处理。

13.用于癌症的预防性和治疗性组合物,所述组合物包含由权利要求9所述方法制备的、具有提高的细胞毒性的NK细胞。

14.如权利要求13所述的用于癌症的预防性和治疗性组合物,其中,所述癌症选自于由乳腺癌、黑素瘤、胃癌、肝癌、结肠癌和肺癌组成的组。

15.治疗癌症的方法,所述方法包括将药学上有效剂量的权利要求13所述的组合物给予患有癌症的受试者的步骤。

16.如权利要求15所述的治疗癌症的方法,其中,所述癌症选自于由乳腺癌、黑素瘤、胃癌、肝癌、结肠癌和肺癌组成的组。

17.预防癌症的方法,所述方法包括将药学上有效剂量的权利要求13所述的组合物给予受试者的步骤。

18.如权利要求17所述的预防癌症的方法,其中,所述癌症选自于由乳腺癌、黑素瘤、胃癌、肝癌、结肠癌和肺癌组成的组。

19.由权利要求9所述的方法制备的具有提高的细胞毒性的NK细胞在用于癌症的预防性和治疗性组合物的制备中的用途。

20.如权利要求19所述的用途,其中,所述癌症选自于由乳腺癌、黑素瘤、胃癌、肝癌、结肠癌和肺癌组成的组。

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