[发明专利]N-钙黏着蛋白:癌症诊断和治疗的靶标

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2008年11月10日提交的USSN 12/268,302的优先权，该申请通过引用全文纳入本文。

发明背景

引言

前列腺癌是美国男性中最常见的恶性肿瘤和癌症相关死亡的第二大主要原因。前列腺癌是生物学和临床上异质的疾病。患有此种恶性肿瘤的大部分男性携带缓慢生长的肿瘤，这些肿瘤可能不影响个体的自然寿命，而某些人则患上快速进行的转移性肿瘤。PSA筛选受限于缺乏特异性并且不能预测哪些患者具有产生激素难治转移性疾病的风险。最近的研究提倡降低诊断的PSA阈值，这样可能增加前列腺癌诊断数量，更难以鉴定患有无痛和侵袭性癌症的患者(Punglia等.，N Engl J Med，349：335-342(2003))。急需与临床结果相关或鉴定可能患有侵袭性疾病的患者的新血清和组织标记物(Welsh等.，Proc Natl Acad Sci U S A，100：3410-3415(2003))。

最近的表达分布研究表明转移性与非转移性肿瘤的表达特征可能存在于原发性肿瘤中(Ramaswamy等.，Nat Genet，33：49-54(2003)；Sotiriou等.，Proc Natl Acad Sci U S A，100：10393-10398(2003))。原发性肿瘤中也存在一定频率的肿瘤倾向于转移至特定器官的其它特征(Kang等.，Cancer Cell，3：537-549(2003))。这些最近的观察结果表明可在早期疾病中鉴定转移前或激素难治性前列腺癌的新型标记物。这些标记物还在转移性或激素难治性前列腺癌发展的生物学特性中发挥作用。存在于原发性肿瘤中，与结果相关并在前列腺癌发展的生物学特性中发挥作用的基因的最新例子包括EZH2和LIM激酶(Varambally等.，Nature，419：624-629(2002)；Yoshioka等.，Proc Natl Acad Sci U S A，100：7247-7252(2003))。然而，这两种基因均非分泌型的。

在此，我们描述了一种治疗或诊断癌症患者的方法，其中癌细胞中N-钙黏着蛋白以正常或较低水平表达，或由癌细胞的亚组表达并且未过表达。我们还报道了一种通过测定测试组织样品中N-钙黏着蛋白存在与否或含量来鉴定癌症干细胞的方法。

发明概述

在第一方面，本发明提供治疗癌症患者的方法，包括以下步骤：从具有患表达N-钙黏着蛋白的癌症风险的个体获得测试组织样品；测定该测试组织样品中N-钙黏着蛋白存在与否或含量，与已知癌症阴性的个体的对照组织样品作比较；藉此诊断表达N-钙黏着蛋白的所述癌症，其中所述N-钙黏着蛋白以正常或低水平表达，或者由所述细胞的亚组表达，其中所述N-钙黏着蛋白未过表达；和将有效量的N-钙黏着蛋白抗体或其片段给予具有患表达N-钙黏着蛋白的癌症风险的个体。

在另一方面，本发明提供鉴定癌症干细胞的方法，包括以下步骤：从具有患表达N-钙黏着蛋白的癌症风险的个体获得测试组织样品；测定该测试组织样品中癌症干细胞存在与否，与已知癌症阴性的个体的对照组织样品作比较；其中所述N-钙黏着蛋白以正常或低水平表达，或者由所述干细胞的亚组表达和未过表达。

在一个实施方式中，所述组织样品是前列腺或膀胱组织。在另一个实施方式中，所述癌症是前列腺癌。在另一个实施方式中，所述癌症是膀胱癌。在另一个实施方式中，所述癌症是激素难治性前列腺癌。在另一个实施方式中，所述癌症是转移性癌症。在另一个实施方式中，所述抗体是单克隆抗体。在另一个实施方式中，所述片段是scFV。在另一个实施方式中，所述片段是二抗体(diabody)。

在以上任一个方面和实施方式中，待治疗的所述组织、癌症、对象或患者是人或哺乳动物。在以上任一个方面和实施方式中，所述癌症可以是不依赖雄激素的癌症。

附图简述

图1.(a)不依赖雄激素的LAPC 9前列腺癌的免疫组化染色，显示N-钙黏着蛋白仅由小亚组细胞表达；(b)用对照PBS或N-钙黏着蛋白抗体1H7和EC4治疗依赖和不依赖雄激素的LAPC 9肿瘤。

图2.分选N-钙黏着蛋白阳性和阴性细胞，从而分别产生100％和0％N-钙黏着蛋白阳性的细胞群。

图3和4.从纯N-钙黏着蛋白阳性和阴性细胞生长的肿瘤与未分选对照群的FACS分析。

图5和6.N-钙黏着蛋白序列。

发明详述