[发明专利]硫醇基官能化试剂及其用途

权利要求书

1.一种用于修饰具有至少一个反应性硫醇基的多肽的方法，所述方法包括使所述多肽与包含具有乙烯基取代基的含氮芳香杂环的官能化试剂相接触，所述乙烯基取代基能够与所述多肽的至少一个硫醇基反应，其中所述官能化试剂与聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团共价连接，使得所述官能化试剂的乙烯基取代基与所述多肽的硫醇基反应，从而使所述聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团与所述多肽共价连接。

2.一种方法，其包括使具有至少一个反应性硫醇基的多肽与包含具有乙烯基取代基的含氮芳香杂环的官能化试剂相接触，所述乙烯基取代基能够与所述多肽的至少一个硫醇基反应，其中所述官能化试剂与聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团共价连接，使得所述官能化试剂的乙烯基取代基与所述多肽的所述硫醇基反应，从而使得所述聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团与所述多肽共价连接。

3.权利要求1或权利要求2的方法，还包括使包含具有乙烯基取代基的含氮芳香杂环的官能化试剂前体与所述聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团反应来产生所述官能化试剂的初始步骤。

4.前述权利要求中任一项的方法，其中所述聚(亚烷基二醇)分子是聚乙二醇(PEG)分子。

5.前述权利要求中任一项的方法，其中所述含氮芳香杂环是吡啶环、嘧啶环或叠氮环。

6.前述权利要求中任一项的方法，还包括确定所述多肽中反应性硫醇基的位置，以及任选地将其中的一些进行保护。

7.前述权利要求中任一项的方法，还包括通过化学反应或通过定点突变以产生在所述多肽的一个或更多个期望位置上具有硫醇基的变体多肽来对母体多肽进行修饰的起始步骤。

8.前述权利要求中任一项的方法，其中所述硫醇基存在于半胱氨酸残基中。

9.前述权利要求中任一项的方法，其中所述包含具有乙烯基取代基的含氮芳香杂环的官能化试剂以下述通式表示：

其中：

X和Y独立地选自CH或N；

其中至少R₁以及任选地R₂与聚(亚烷基二醇)分子和/或聚糖基团共价连接；

其中：

R₁以及任选地R₂独立地选自：

-(CH₂)_n-Z-(CH₂)_o-C(O)-R，其中Z是O、S或NH，n是0至10，o是0至10，并且其中R是氢、聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团；或者

-(CH₂)_n-Z-(CH₂)_o-R，其中Z是O、S或NH，n是0至10，o是0至10，并且其中R是氢、聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团；或者

-C(O)-Z-(CH₂)_o-R，其中Z是O、S或NH，o是0至10，并且其中R是氢、聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团；或者

-(CH₂)_n-Z-C(O)-(CH₂)_o-R，其中Z是O、S或NH，n是0至10，o是0至10，并且其中R是氢、聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团；或者

-Y-(CH₂)_n-Z-C(O)-(CH₂)_o-R，其中Y是芳基基团、O、S或NH，Z是O或NH，n是0至10，o是0至10，并且其中R是氢、聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团；或者

-Y-R，其中Y是O或S，R是氢、聚糖、聚(亚烷基二醇)分子、芳基或C_1-10烷基；

前提是当R₂不与聚(亚烷基二醇)分子或聚糖基团相连时，其可另外选自氢或吸电子基团，例如卤素(F、Cl或Br)、-NO₂、-CO₂H、-CO₂R₄、COR₄、-CHO、-CN、-CF₃、-SO₂NR₄R₅、烷基或苯基，其中R₄和R₅独立地选自氢或C_1-10烷基；

或者R₂和R₃一起形成稠合(杂)芳环取代基，其可包括但不限于吲哚、吲唑、苯并咪唑、喹啉、异喹啉、氮丙啶或嘌呤；

或者R₃选自氢或选自以下的取代基：卤素、羟基、醚、甲酰基、酰基、羧基、酯、酰氧基、酰胺基、酰基胺基、硫代酰胺基、四唑基、氨基、硝基、亚硝基、叠氮基、氰基、异氰基、氰氧基、异氰氧基、硫氰基、异硫氰基、硫醚、磺酸、磺酸酯/盐、砜、磺酰基氧基、亚磺酰基氧基、硫酰氨基、磺酰氨基、亚磺酰氨基、氨磺酰基、磺酰胺基、C_1-7烷基。