[发明专利]针对组织因子途径抑制剂(TFPI)的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及特异性地结合组织因子途径抑制剂(TFPI)的抗体。

背景技术

血管壁损伤会将组织因子(TF)暴露于血液循环，TF在携带TF的细胞的表面上与因子VII/活化的因子VII (FVII/FVIIa)形成复合物。这导致因子X (FX)向Fxa的活化，所述Fxa与Fva一起产生有限量的凝血酶(FIIa)。小量凝血酶会活化血小板，这导致磷脂的表面暴露，所述表面暴露会支持由FVIIIa/FIXa组成的tenase复合物的结合。

所述tenase复合物产生大量的Fxa，所述Fxa随后促进全凝血酶爆发（burst）。机械上强的纤维蛋白结构的形成和止血塞的稳定化需要全凝血酶爆发。FVIII或FIX在血友病患者中缺失或以低水平存在，且由于tenase活性的缺失，产生Fxa的能力较低，且不足以支持凝固的传播期（propagation phase）。相反，TF-介导的开始期（initiation phase）不依赖于tenase复合物的形成。但是，在最初的FXa产生后不久，TF-途径被血浆抑制剂阻断。

通过中和Fxa的催化活性，并通过在Fxa存在下对TF-FVIIa复合物的抑制，组织因子途径抑制剂(TFPI)会下调正在进行的凝固。TFPI抑制在细胞表面上的TF/FVIIa/FXa复合物，或者抑制释放的Fxa（继之为FVIIa/TF抑制）。

发明内容

发明人已经鉴定出特异性地结合TFPI并从而调节它的活性的抗体。本发明涉及这些抗体和从这些抗体衍生出的或具有与这些抗体类似的结合性质的其它有关的抗体。

因此，本发明涉及这样的抗体，其特异性地结合组织因子途径抑制剂(TFPI)，并减少(a)人FVIII-缺乏的血浆和/或(b)人全血的凝固时间。

优选的抗体包含SEQ ID NO: 3的轻链可变区和SEQ ID NO: 6的重链可变区。

本发明也提供了编码本发明抗体的多核苷酸，诸如编码本发明的抗体轻链和/或抗体重链的多核苷酸。

本发明也提供了药物组合物，其包含本发明的抗体或多核苷酸和药学上可接受的载体或稀释剂。

还提供本发明的抗体、多核苷酸和组合物用于：(a)治疗或预防出血障碍，或(b)刺激血液凝固。也就是说，本发明提供了(a)治疗或预防出血障碍的方法，或(b)刺激血液凝固的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用治疗或预防有效量的本发明的抗体、多核苷酸或组合物。

附图说明

图A和B显示了在用对照IgG (血友病)或抗-TFPI抗体TFPI-3F18A2 (3F18)治疗后在暂时患血友病的兔中测得的表皮出血时间和血液损失。

图2显示了抗体TFPI-3F18A4B1的VL（图2A）和VH（图2B）序列的核苷酸序列和翻译的多肽序列。

图3显示了3F18抗体的VL (A)和VH (B)的氨基酸序列。根据Kabat，显示在序列上面的编号。在Kabat编号中，用粗体带有下划线的文字突出与CDR环对应的位置。

图4显示了TFPI1的序列。用粗体显示Kunitz结构域：TFPI1 Kunitz结构域1 =氨基酸26-76；TFPI1 Kunitz结构域2 =氨基酸97-147；TFPI1 Kunitz结构域3 =氨基酸188-238。用斜体显示TFPI1的C-端部分氨基酸240-276。

图5显示了在用抗-FVIII抗体、抗-TFPI-抗体刺激后、并随后取血的血小板数目。这在对照血友病模型中和在有本文所述的抗-TFPI抗体3F18存在下进行。

序列表简述

SEQ ID NO: 1给出了人TFPI1的氨基酸序列。

SEQ ID NO 2-4给出了TFPI-3F18A4B1单克隆抗体的轻链可变结构域 (VL)的多核苷酸(编码和互补体)和多肽序列。

SEQ ID NO 5-7给出了TFPI-3F18A4B1单克隆抗体的重链可变结构域 (VH)的多核苷酸(编码和互补体)和多肽序列。

SEQ ID NO: 8给出了用于重链可变结构域扩增的反向引物的序列，且SEQ ID NO: 9给出了用于轻链扩增的反向引物的序列。

具体实施方式