[发明专利]包括经修饰的E2蛋白质的重组猪瘟病毒(CSFV)和用于生成所述重组CSFV 的方法有效
申请号: | 200980156450.7 | 申请日: | 2009-12-23 |
公开(公告)号: | CN102317449A | 公开(公告)日: | 2012-01-11 |
发明(设计)人: | J·A·科特卡斯;R·P·M·弗洛伊特 | 申请(专利权)人: | 英特威国际有限公司 |
主分类号: | C12N7/04 | 分类号: | C12N7/04;C07K14/18;A61K39/12;G01N33/569 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 刘晓东 |
地址: | 荷兰博*** | 国省代码: | 荷兰;NL |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包括 修饰 e2 蛋白质 重组 猪瘟 病毒 csfv 用于 生成 方法 | ||
1.重组猪瘟病毒(CSFV),其在对应于亲本CSFV多聚蛋白质的位置829-837的E2蛋白质内“TAVSPTTLR”结构域中包含至少一个氨基酸的缺失。
2.权利要求1的重组CSFV,其中所述缺失包含所述“TAVSPTTLR”结构域中脯氨酸的缺失。
3.权利要求1或2的重组CSFV,其中所述缺失包含至少2个氨基酸。
4.根据权利要求1-3中任一项的重组CSFV,其包含所述亲本基因组的至少一个进一步改变。
5.根据权利要求4的重组CSFV,其中所述至少一个进一步改变是沉默突变。
6.根据权利要求5的重组CSFV,其中所述沉默突变是在所述ERNS基因中位置1549处的U至C改变。
7.根据权利要求4的重组CSFV,其中所述至少一个进一步改变在所述E2蛋白质中形成N-连接糖基化位点
8.根据权利要求4的重组CSFV,其中所述至少一个进一步改变是在所述E2蛋白质中位置774处的天冬氨酸(D)置换。
9.根据权利要求4的重组CSFV,其中所述至少一个进一步改变导致位置831处的甘氨酸(G)、和/或位置789处的苯丙氨酸(F)、和/或位置445处的苏氨酸(T)。
10.根据权利要求4的重组CSFV,其包含在所述E2蛋白质内“TAVSPTTLR”结构域的位置833和834处的脯氨酸和苏氨酸缺失,进一步包含在位置1549处的U至C改变、在位置634处的天冬氨酸(D)、在所述E2蛋白质中位置774处的天冬酰胺(N)、和在位置831处的甘氨酸(G)。
11.根据前述权利要求中任一项的重组CSFV,其中所述亲本基因组是减毒CSFV株的基因组。
12.根据前述权利要求中任一项的重组CSFV,其中所述亲本基因组是C(中国)株的基因组。
13.活CSF疫苗,其包含根据权利要求1-12中任一项的重组CSFV。
14.保护动物不受CSF的方法,其包括给所述动物施用有效量的权利要求13的疫苗。
15.区分由CSFV感染的动物与未感染的动物或用权利要求13的CSF疫苗进行接种的动物的方法,其包括在血清学测试中分析动物的血清。
16.权利要求15的方法,其中所述血清学测试是基于肽的ELISA。
17.cDNA分子,其包含编码在“TAVSPTTLR”结构域中具有至少一个氨基酸的缺失的E2蛋白质的重组猪瘟病毒(CSFV)基因组。
18.用于分离可以在疫苗中使用的传染性重组CSFV的方法,所述疫苗允许区分受感染动物与接种疫苗的动物,所述方法包括:
选择由所述病毒编码的蛋白质的免疫显性结构域;
在所述病毒中编码所述免疫显性结构域的基因组区域内引入改变;
使所述经改变的基因组与合适细胞或细胞系接触;
传代所述合适细胞或细胞系,以允许病毒繁殖;和
从所述合适细胞或细胞系中分离传染性病毒。
19.权利要求18的方法,其中基因组区域中的所述改变是至少一个氨基酸的缺失。
20.传染性重组CSFV,其通过权利要求18-19中任一项的方法可以获得。
21.权利要求20的传染性重组CSFV在疫苗中的用途。
22.根据权利要求21的用途,其中所述疫苗允许区分受感染动物与未感染动物或接种疫苗的动物。
23.基于肽的ELISA,其包括特异性识别包含完整TAVSPTTLR结构域的CSFV E2蛋白质的一种或多种抗体。
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