[发明专利]大规模的胰岛纯化

权利要求书

1.一种分离胰岛的方法，所述方法包括：

用减少对流的弯管在容器中生成包含至少100毫升的连续的密度梯度，所述对流破坏梯度；

在该密度梯度中装载包含胰岛的溶液；

离心所述容器，其中对胰岛的压力小于50Pa；并且

从该梯度中分离胰岛。

2.权利要求1所述的方法，其中所述梯度和所述包含胰岛的溶液用稀释溶液封顶。

3.权利要求1所述的方法，其中所述胰岛是顶部装载的并且其中所述梯度包含：

在容器底部的高密度第一层，

在高密度第一层上的包含连续的密度梯度的第二层，

在第二层上的第三层，该第三层包含含有胰岛消化物的低密度溶液；知

在第三层上的包含稀释溶液的第四层。

4.权利要求1所述的方法，其中所述胰岛是底部装载的并且其中所述梯度包含：

在容器底部的含有胰岛消化物的高密度第一层；

在第一层上的包含连续的密度梯度的第二层；和

包含稀释溶液的第三层。

5.权利要求1所述的方法，其中所述梯度包含连续密度的溶液，所述连续密度的溶液进一步定义为包含通过使用弯管改变低密度与高密度的体积比得到的低密度到高密度。

6.权利要求1所述的方法，其中所述梯度包含连续密度的溶液，所述连续密度的溶液进一步定义为包含低密度到高密度，所述低密度到高密度包含通过使用弯管改变碘克沙醇与ET-Kyoto溶液的体积比而产生的含有碘克沙醇到ET-Kyoto溶液。

7.权利要求1所述的方法，其中所述梯度包含连续密度的溶液，所述连续密度的溶液进一步定义为包含通过使用弯管改变碘克沙醇与ET-Kyoto溶液的体积比产生的低密度(密度：1.077)到高密度(密度：1.095-1.125)碘克沙醇-ET-Kyoto溶液。

8.权利要求1所述的方法，其中所述瓶子具有平滑的内表面。

9.权利要求1所述的方法，其中所述梯度是使用弯曲的顶端形成的，所述弯曲的顶端在生成梯度时能减少梯度中的对流。

10.权利要求1所述的方法，其中所述容器为200、250、300、400、500、600、700、800、900或1,000毫升。

11.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包括从包含胰岛细胞的收集容器中分离胰岛细胞的步骤。

12.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包括步骤：

从包含胰岛细胞的收集容器中分离胰岛细胞；

洗涤胰岛细胞；并且

将胰岛植入新的宿主体内。

13.权利要求1所述的方法，其中所述胰岛为人类胰岛。

14.权利要求1所述的方法，其中所述胰岛为尸体的胰岛。

15.一种分离胰岛的方法，所述方法包括：

用减少对流的弯管在容器中生成包含至少100毫升的连续的密度梯度，所述对流破坏梯度，所述连续密度的溶液进一步定义为包含通过使用弯管制备的低密度(密度：1.077)到高密度(密度：1.095-1.125)；

在梯度上装载稀释溶液中的胰岛细胞；

离心所述容器，其中对胰岛的压力小于50Pa；

从容器的上部到底部将梯度分入到两个或多个收集容器中；

选择含有胰岛的收集容器；并且

从梯度中分离胰岛。

16.权利要求15所述的方法，其中所述梯度和所述包含胰岛的溶液用稀释溶液封顶。

17.权利要求15所述的方法，其中所述胰岛是顶部装载的并且其中所述梯度包含：

在容器底部的高密度第一层，

在高密度第一层上的包含连续的密度梯度的第二层，

在第二层上的第三层，该第三层包含含有胰岛消化物的低密度溶液；和

在第三层上的包含一种稀释溶液的第四层。

18.权利要求15所述的方法，其中所述胰岛是底部装载的并且其中所述梯度包含：

在容器底部的含有胰岛消化物的高密度第一层；

在第一层上的包含连续的密度梯度的第二层；和

包含稀释溶液的第三层。