[发明专利]与表皮生长因子受体特异性地结合的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)特异性地结合的抗体。

背景技术

表皮生长因子受体(EGFR)是170kDa的I型跨膜蛋白质，已知EGFR在很多人肿瘤(例如，肺癌、乳腺癌、结肠癌、胃癌、脑癌、膀胱癌、头癌、颈癌、卵巢癌和前列腺癌)中过表达。其过表达经常伴随EGFR配体(TGF-α(转化生长因子-α(transforming growth factor-α))和EGF(表皮生长因子(epidermal growth factor)))的产生，并且已证实所述配体与EGFR的结合诱导细胞增殖和肿瘤生长。因此，使用抗EGFR的抗体阻断这种配体与EGFR之间的相互作用可抑制肿瘤生长，这已经通过使用抗EGFR之单克隆抗体的实验证明是有效的。

当前用于治疗转移性结肠直肠癌之临床应用的抗体C225(商品名：爱必妥(Erbitux)；ImClone，U.S)是嵌合抗体，其包含连接至人抗体IgG1恒定区的小鼠抗体可变区(其中包含约30％的小鼠氨基酸序列)。已证明C225抑制肿瘤细胞生长、体外EGFR磷酸化和裸小鼠中的肿瘤形成，并且，当与特定的化疗剂一起使用时，还完全根除小鼠中的人肿瘤异种移植物。然而，在一些(～10％)用其治疗的患者中，该抗体具有诱导免疫反应的问题。因此，存在对改进的抗EGFR之治疗性抗体的需要。

用于靶向治疗的治疗剂占美国食品及药物管理局(Food and Drug Administration，FDA)最近所批准的抗癌药物的约50％。这样的抗体提供靶专一性和有效地动员免疫系统的能力，这些与其较长的生物半衰期相组合已经引起了研究者对其治疗潜力的注意。因此，美国FDA最近批准使用多种抗体用于癌治疗。在很多对疾病的治疗方法中，抗体发挥突出的作用，随着最近允许开发全人抗体之技术的出现，抗体变得更具吸引力。

本发明人努力开发新颖的、改进的、具有新互补决定区(complementarity determining region，CDR)的抗体，并且已发现这样的抗体可通过阻断EGFR介导的信号转导而用于癌治疗。

发明内容

因此，本发明的一个目的是提供与表皮生长因子受体特异性地结合的新抗体。

本发明的另一个目的是提供分别编码所述抗体的重链可变区和轻链可变区的DNA，以及包含所述DNA的表达载体。

本发明的另一个目的是提供以所述表达载体转化的细胞系。

本发明的另一个目的是提供包含所述抗体的用于治疗癌的药物组合物。

根据本发明的一个方面，提供了与表皮生长因子受体(EGFR)特异性地结合的抗体，其包含：a)包含互补决定区(CDR)1、2和3的重链可变区，所述互补决定区1、2和3分别具有SEQ ID NO：1、2和3的氨基酸序列；b)包含CDR 1、CDR 2和CDR 3的轻链可变区，所述CDR1、CDR 2和CDR 3分别具有SEQ ID NO：4、5和6的氨基酸序列；c)重链恒定区；和d)轻链恒定区。

此外，提供了与表皮生长因子受体(EGFR)特异性地结合的抗体，其包含：a)包含CDR 1、CDR 2和CDR 3的重链可变区，所述CDR 1、CDR 2和CDR 3分别具有SEQ ID NO：1、2和3的氨基酸序列；b)包含CDR 1、CDR 2和CDR 3的轻链可变区，所述CDR 1、CDR 2和CDR3分别具有SEQ ID NO：9、5和6的氨基酸序列；c)重链恒定区；和d)轻链恒定区。

根据本发明的另一个方面，提供了编码所述抗体的重链可变区或轻链可变区的DNA，以及包含所述DNA的表达载体。

根据本发明的另一个方面，提供了以所述表达载体转化的细胞系。

根据本发明的另一个方面，提供了包含所述抗体的用于治疗癌的组合物。

附图说明

通过对本发明的以下描述与附图相结合，本发明的上述和其他目的与特征会变得显而易见，所述附图分别显示：

图1：电泳(1％琼脂糖凝胶)的照片，其展示PCR所合成的分别编码本发明的重链可变区(heavy chain variable region，VH)和轻链可变区(light chain variable region，VL)的DNA；