[发明专利]可溶性的桥粒芯糖蛋白I蛋白物质用于筛选抗衰老活性剂的用途

说明书

技术领域

本发明涉及可溶性肽复合物或非复合物的应用，该肽至少部分地衍生于桥粒芯糖蛋白I，其对出现一个或多个皮肤衰老征兆的表皮表现出了潜在活性剂作用。 

背景技术

上皮是一种组织，该组织中的细胞相互结合并连结于基膜上。该细胞可以形成一种外膜，如在皮肤表面、或者表皮、或在粘膜表面形成内膜，也可形成腺。 

更具体地，该上皮是一种内环境稳定的组织，其内稳定环境源于在细胞增殖、转移与分化的所有阶段都实现了一套调整完好的细胞内与细胞外信号，并且该上皮组织还是各种不同细胞外基质成分的综合体。这些信号特别地源于角质形成细胞所产生的因子的运动。 

保持正确的上皮生理功能涉及，特别地是上皮细胞终末分化和/或蛋白多糖合成。 

至于更优选地表皮是一种上皮，通常分为角质形成细胞基底层、“刺状”层、“粒状”层和角质层。该角质形成细胞基底层作为表皮生发层的成分，包含特别地皮肤干细胞，“刺状”层是由许多基底层上的多面形细胞层组成的，“粒状”层包含一个或三个以前所知的扁平细胞层，该扁平细胞层包含不同的细胞质内含物和角质透明蛋白粒，最后是一组上层细胞，称为角质层(或者角质层)，该角质层是由处于分化终末阶段的角质形成细胞(即comeocytes)构成。 

角质层是皮肤的最外层，其作用是作为屏障、将皮肤组织与外界环境隔离开，毛干是毛囊的突出部分，其毛囊组成了浓浓的头发，角质层与毛干都代表了角质形成细胞分化过程的结果。基底层的角质形成细胞在成熟过程中分化并转移后，表皮出现分化，从而形成comeocytes，该角质细胞是一种彻底的角质化死细胞。这种分化是完全协调现象的产物，该现象形成了保持不变的表皮厚度，从而确保表皮内环境的稳定。 

许多皮肤病或病理学条件起因于表皮内稳定环境的紊乱。 

至于衰老皮肤，其紊乱一般会通过皱纹(小皱纹和深层皱纹)的出现、弹性的丧失、粗糙感和干燥来显现。从组织学的角度看，会发现真皮表皮连接处变扁及真皮与表皮的厚度变薄。胶原和葡萄糖胺聚糖含量减少。皮肤的屏障作用受到损坏。所有这些现象都会由于太阳下的慢性暴晒而增多。 

同样地，这种紊乱在更年期妇女身上可能会更加厉害。 

现在，众所周知的是，这些紊乱现象可能会特别地与角质层中某些蛋白的表达和/或其生物活性的不同调节有关。特别地是桥粒芯糖蛋白I的情况。 

作为一种跨膜糖蛋白，桥粒芯糖蛋白I(也称作DGI)以其前蛋白原的形式存在，并包含1049种氨基酸，其分子量约为114Kda至150Kda，具体取决于该蛋白是否糖基化。蛋白序列在天冬酰胺残基上的糖基化位点是36、110和180位置，除此之外，该蛋白序列也包含钙结合部位。 

该蛋白与钙粘素相关，并属于包括桥粒芯糖蛋白II和III的蛋白家族。DGI只以桥粒的形式存在，桥粒是DGI主要的结构元素之一。 

专利文件US 2004/0142335报道了：通过转录组分析，与年轻人相比，年长的人皮肤上的mRNA(信使核糖核酸)表达有所增加，该mRNA(信使核糖核酸)编码桥粒芯糖蛋白I蛋白。该专利没有公开任何的可溶性桥粒芯糖蛋白I。 

发明专利内容 

近来，本发明人指出了在表皮自然老化过程中，角质层上的桥粒芯糖蛋白I表达明显增加，并且得到了积累。所以，桥粒芯糖蛋白I在角质层上的表达水平成为一种用以描述皮肤、优选地衰老皮肤的生理条件特征的有效指标。 

就发明本身而言，本发明源于本发明人对人体角质层上可溶性肽的特征描述，该角质层经过了脱屑性治疗，并且该可溶性肽不同于、但却衍生于桥粒芯糖蛋白I。人们可认为本发明人所述肽衍生于或至少部分衍生于桥粒芯糖蛋白I的蛋白水解作用。 

特别是，不同于全序列桥粒芯糖蛋白I，命名为SEQ ID NO2的可溶性蛋白。如下文所述，凭借特殊的ELISA(酶联免疫吸附测定)法的研制，优选以下实施例1中所述的方法，本发明人描述了该蛋白的可溶性肽复合物或非复合物的特征。因此，人们发现这些可溶性物质是一种特别有益的工具，可以用来筛选抗衰老活性 剂，或者甚至描述预防和/或治疗皮肤衰老的治疗效果，特别地通过一种活动，或许是对皮肤衰老过程中角质层上所积累的桥粒芯糖蛋白I的降解活动。 

在这两种情况中，活性剂的作用或本发明所述的治疗效果通过增加至少一种，或更多种本发明所述可溶性物质的释放得以验证。