[发明专利]双表达G基因的重组狂犬病病毒的构建及其生物学特性分析

权利要求书

1.一种具有更好的安全性和免疫原性的重组狂犬病病毒株，所述病毒 株特征在于在其基因组中的G基因和L基因之间插入额外的G基因，其 在基因组中包含两个G基因，所述重组病毒株是由野生型狂犬病毒株 Flury-LEP构建而来，所述插入的G基因的序列如SEQ ID NO：8所示。

2.一种构建权利要求1的重组狂犬病病毒株的方法，所述方法包括下 列步骤；

1)构建转录质粒，其中将G基因序列插入野生型狂犬病病毒株 Flury-LEP的基因组中的G基因和L基因之间，得到含有双G基因的重组 基因组全长cDNA克隆；

2)构建辅助质粒系统，所述辅助质粒系统分别编码野生型狂犬病毒 株LEP的核蛋白N、磷酸蛋白P及聚合酶蛋白L；

3)使用含有双G基因的重组基因组全长cDNA克隆的质粒载体以及 辅助质粒共转染到容许所述病毒复制的宿主细胞，培养所述宿主细胞；

4)拯救病毒。

3.权利要求2的方法，其中所用的宿主细胞为BHK-21细胞。

4.一种质粒载体，其中含有如权利要求1所构建的含有双G基因的 重组基因组全长cDNA克隆。

5.权利要求4的质粒载体，其构建自质粒pCI-RBz。

6.如权利要求1构建的重组病毒株用于制备狂犬病病毒灭活疫苗的应 用。