[发明专利]薄荷同源多倍体的诱导和检测方法

权利要求书

1.一种薄荷同源多倍体的诱导和检测方法，其特征在于包括以下步骤：薄荷离体茎尖做 为外植体在初代培养基上建立无菌体系，以一定浓度的秋水仙素处理离体无菌不定芽后，进 行继代培养，以流式细胞仪法检测染色体倍性变化，检测确认的染色体加倍材料经增殖培养、 生根培养、炼苗、移栽，即可获得多倍体植株；

所述无菌体系的建立方法为：以离体茎尖做为外植体，采用初代培养基为MS基本培养 基+1.0mg·L^-1 6-BA+0.2mg·L^-1 NAA+5.5g·L^-1琼脂+30g·L^-1蔗糖，pH 5.5～5.8，培养条件为温 度25℃，光照时间8～10h，光照强度1500～2000lx；

所述秋水仙素处理的材料为组织培养的离体无菌不定芽；用0.1％～0.2％秋水仙素溶液浸 泡24～48h后，接种在不含秋水仙素的继代培养基上；或取初代培养的离体无菌不定芽，接 种在添加20mg·L^-1秋水仙素的继代培养基中，培养30d后转入不含秋水仙素的继代培养基中 继续培养；所述继代培养的培养基、培养条件与初代培养相同；

经秋水仙素处理的材料在继代培养20d后，取叶片，用流式细胞仪进行倍性检测；染色 体加倍的试管苗即为同源多倍体；

所述增殖培养基为MS基本培养基+2.0mg·L^-1 6-BA+0.2mg·L^-1 NAA+5.5g·L^-1琼脂+30 g·L^-1蔗糖，pH 5.5～5.8：培养条件为温度25℃，光照时间8～10h，光照强度1500～2000lx； 培养20d，转接增殖2次；

所述生根培养基为1/2MS+0.5mg·L^-1 6-BA+0.2mg·L^-1 NAA+5.5g·L^-1的琼脂+30g·L^-1蔗 糖，pH 5.5～5.8；培养条件为温度25℃，光照时间8～10h，光照强度1500～2000lx；培养20 d。

2.根据权利要求1所述的薄荷同源多倍体的诱导和检测方法，其特征在于：所述炼苗、 移栽过程为：将生根苗培养瓶移出培养室，打开瓶盖，喷水保湿，室温炼苗4～5d，取出后洗 去根部培养基，栽入填有腐殖土、珍珠岩和沙的穴盘内，室内放置3～5d后，移至室外遮阴 棚内，1个月后移入大田；所述腐殖土、珍珠岩和沙的比为4∶3∶2。