[发明专利]一种以烟碱脱氢酶作为烟草加工辅助的酶制剂及制备、使用方法有效
申请号: | 201010039186.3 | 申请日: | 2010-01-20 |
公开(公告)号: | CN101775379A | 公开(公告)日: | 2010-07-14 |
发明(设计)人: | 韩伟;何宝玉;陈应昆 | 申请(专利权)人: | 云南万芳生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12Q1/32;A24B15/20 |
代理公司: | 昆明科阳知识产权代理事务所 53111 | 代理人: | 孙山明 |
地址: | 650118云南省昆明市*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 烟碱 脱氢酶 作为 烟草 加工 辅助 酶制剂 制备 使用方法 | ||
1.一种用烟碱脱氢酶制备用于烟草加工的辅助酶制剂的方法,该辅助酶制剂中的碱脱氢酶的酶活力为190U/mL,其特征是该制备方法包括以下步骤:
(1)将烟碱脱氢酶粗品固体用pH 7.0缓冲液溶解,其质量体积比为1g︰20mL,3500r/min离心20min,取上清液,加入(NH4)2SO4,使硫酸铵终浓度为62%,静置24h后4℃ 15000r/min离心30min,取上清液,补加浓度为10% (W/V)的(NH4)2SO4过夜,再4℃ 15000r/min离心30min,取沉淀、合并;
(2)用步骤(1)缓冲液用量体积的一半充分溶解步骤(1)所取沉淀后,加0.1%EDTA溶液补体积至步骤(1)中缓冲液体积,静置2h,离心,取上清液测定酶活力,多批次兑配,使酶活力为190U/mL。
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