[发明专利]微流控芯片及核酸提取纯化方法

权利要求书

1.一种微流控芯片，其特征在于，包括细胞培养微单元、混合微单元、核酸收集微单元及微通道，所述细胞培养微单元用于培养增殖和消化细胞，再将消化好的细胞通入至所述混合微单元，所述混合微单元用于裂解消化好的细胞，并将细胞裂解液通入至所述核酸收集微单元，所述核酸收集微单元用于收集纯化核酸，所述微通道连接所述细胞培养微单元、混合微单元及核酸收集微单元，并是液体通入和流出的通道。

2.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片为3层膜结构。

3.如权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，所述3层膜结构包括两层聚二甲基硅氧烷膜和一层玻璃基片，所述两层聚二甲基硅氧烷膜位于所述玻璃基片上方。

4.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，还包括气室、气体通道、横向微阀及纵向微阀，所述气室用于存储气体，气体通道用于连接气室并且控制气体的流向，所述横向微阀及纵向微阀控制所述微通道中液体的流向。

5.如权利要求4所述的微流控芯片，其特征在于，所述气室、气体通道、横向微阀及纵向微阀位于所述两层聚二甲基硅氧烷膜之间。

6.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述细胞培养微单元、混合微单元、核酸收集微单元及微通道位于中间的聚二甲基硅氧烷膜与玻璃基片形成的空隙之间。

7.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述核酸收集微单元还包括磁场装置，所述磁场装置用于磁性吸附四氧化三铁磁性纳米颗粒。

8.利用权利要求1所述微流控芯片的核酸提取纯化方法，包括如下步骤：

A、培养含目的核酸的细胞；

B、通入消化液对细胞进行脱壁消化；

C、通入裂解液对消化后的细胞进行裂解，得到含核酸物质的细胞裂解液；

D、从细胞裂解液中提取纯化核酸。

9.如权利要求8所述的核酸提取纯化方法，其特征在于，还包括进行步骤A之前依次使用双蒸水、D-Hanks平衡盐溶液对微流控芯片进行浸泡和冲洗步骤和结束步骤D之后撤去磁场，使用双蒸水对微流控芯片进行冲洗步骤。

10.如权利要求8所述的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述步骤B中通入消化液对细胞进行脱壁消化还包括在此之前通入中性pH的磷酸盐缓冲液对细胞进行冲洗步骤。

11.如权利要求8所述的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述步骤D包括：

D1、通入pH 6.3-6.7的悬浮有四氧化三铁磁性纳米颗粒的缓冲液，通过磁场固定四氧化三铁磁性纳米颗粒；

D2、将含有核酸的细胞裂解液通过四氧化三铁磁性纳米颗粒，在酸性条件下，核酸与四氧化三铁磁性纳米颗粒相结合形成核酸-磁纳米颗粒复合物而被固定；

D3、通入洗涤液对未结合到四氧化三铁磁性纳米颗粒上的蛋白质、脂类细胞杂质成分进行洗涤；

D4、通入pH 8.4-8.6的缓冲液对核酸-磁纳米颗粒复合物进行洗脱，碱性条件下，核酸与四氧化三铁磁性纳米颗粒分离，收集含有纯化核酸的洗脱液。

12.如权利要求8至11中任意一项所述的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述核酸为DNA。