[发明专利]一种γ-氨基丁酸发酵液的脱盐方法无效
申请号: | 201010045842.0 | 申请日: | 2010-01-18 |
公开(公告)号: | CN101812486A | 公开(公告)日: | 2010-08-25 |
发明(设计)人: | 李海星;曹郁生 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C07C229/08;C07C227/40;C12R1/24 |
代理公司: | 南昌洪达专利事务所 36111 | 代理人: | 刘凌峰 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基 丁酸 发酵 脱盐 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种发酵液的脱盐方法,尤其涉及一种γ-氨基丁酸发酵液的 脱盐方法。
背景技术
γ-氨基丁酸是一种非蛋白质组成的天然氨基酸,是哺乳动物体内一种重要的 抑制性神经递质,具有许多重要的生理功能,如降血压、利尿、安定、促进脑 部血流、营养神经细胞、健肝利肾等。研究证实,阿尔茨海默病患者的颞叶皮 层、枕叶视皮质和小脑中的GABA含量较正常人低。
乳酸菌是一类普遍认为安全的细菌(GRAS),具有多种生理活性,如调节 肠道菌群,抑菌抗氧化,增强免疫力,降低血压等。已有将γ-氨基丁酸用于饮 料、果酱、糕点、饼干和调味料等的报道。产γ-氨基丁酸的乳酸菌不仅产生γ- 氨基丁酸,而且能保持发挥自身有益的生理活性,应用前景广阔,经济效益和 社会效益明显。
在短乳杆菌发酵生产γ-氨基丁酸的过程中,由于脱羧反应导致发酵液的pH 值不断升高,因此必须流加酸液调控发酵液的pH值。结果发酵液中产生了大 量的无机盐,经理论计算,发酵液中Na2SO4的浓度高达0.5M。高浓度的无机 盐使后续的纯化工艺难以进行,同时会降低产品纯度和品质。因此在进一步纯 化前,必须去除发酵液中的Na2SO4,以保证后续工艺的进行,最终获得高纯 度、高质量的γ-氨基丁酸纯品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种γ-氨基丁酸发酵液的脱盐方法,该脱盐方法 的脱盐率高,目的产物回收率高;试剂可以回收反复使用,不污染环境。
本发明是这样来实现的,其特征是方法步骤为:
(1)将短乳杆菌活化后,以10%(v/v)的接种量接种于3L发酵培养基中,32 ℃培养36-72h;并于12h和24h分别补入1.5mol和0.7mol的L-谷氨酸钠;整个 发酵过程用10N的硫酸控制pH 5.0;
(2)将发酵液4℃离心除去菌体,在上清液中加入2%(w/v)的活性炭,于80 ℃脱色30min,过滤回收滤液;
(3)加热浓缩上述滤液,当开始瀑沸时立即停止加热,冷却后加入冰乙 酸溶解浓缩物,当固形物不再溶解时,过滤回收滤液。
本发明所述的发酵培养基为:蛋白胨25g,葡萄糖30g,L-谷氨酸钠75g, MnSO4·4H2O 0.01g,吐温80为2mL,蒸馏水1000mL,经调节pH5.0,在高温高 压条件下灭菌。
本发明所述的短乳杆菌的保藏编号为Lactobacillus brevis CCTCCM 208054。
本发明的优点是:脱盐率和目的产物回收率高;试剂可以回收反复使用, 不污染环境。
具体实施方式
实施例1:
将Lactobacillus brevis CCTCCM 208054的短乳杆菌活化后,以10%(v/v)的 接种量接种于3L发酵培养基,32℃培养36h;并于12h和24h分别补入1.5mol 和0.7mol的L-谷氨酸钠;整个发酵过程用10N的硫酸控制pH 5.0,将发酵液4℃ 离心除去菌体,在上清液中加入2%(w/v)的活性炭,于80℃脱色30min后过滤, 回收滤液,加热浓缩上述预处理过的发酵液,当发酵液开始瀑沸时立即停止加 热,冷却后加入冰乙酸溶解浓缩物,当固形物不再溶解时,过滤回收滤液。经 测定,脱盐率≥95%。
实施例2:
将Lactobacillus brevis CCTCCM 208054的短乳杆菌活化后,以10%(v/v)的 接种量接种于3L发酵培养基,32℃培养48h;并于12h和24h分别补入1.5mol 和0.7mol的L-谷氨酸钠;整个发酵过程用10N的硫酸控制pH 5.0。将发酵液4℃ 离心除去菌体;在上清液中加入2%(w/v)的活性炭,于80℃脱色30min后过滤, 回收滤液。加热浓缩上述预处理过的发酵液,当发酵液开始瀑沸时立即停止加 热,冷却后加入冰乙酸溶解浓缩物,当固形物不再溶解时,过滤回收滤液。经 测定,脱盐率≥95%。
实施例3:
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