[发明专利]拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列及其克隆方法和应用无效
| 申请号： | 201010102137.X | 申请日： | 2010-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN101838659A | 公开（公告）日： | 2010-09-22 |
| 发明（设计）人： | 马凌波;蒋科技;张丹;张凤英;乔振国;皮妍;马春艳;石彦红;陶启长;郑俊斌 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/57 | 分类号： | C12N15/57;C12N9/76;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 拟穴青蟹 胰蛋白酶 基因 cdna 序列 及其 克隆 方法 应用 | ||
1.一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，如SEQ ID NO：1所示：
a.序列特征
长度：881bp；
类型：核酸；
链型：双链；
拓扑结构：线性；
b.分子类型：cDNA
c.假设：否；
d.反义：否；
e.最初来源：拟穴青蟹(Scylla paramamosain)。
2.根据权利要求1所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：所述的拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列长度为881bp，其中开放阅读框位于25-804位核苷酸。
3.根据权利要求1所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：根据重复试验所获得的序列与所述的SEQ ID NO.1中从核苷酸第25-804位的核苷酸序列具有70％以上的同源性，或者与SEQ ID NO.1中从核苷酸第25-804位的核苷酸序列杂交。
4.根据权利要求1所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：所述的序列具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的多肽、其保守性变异多肽、其活性片段、其金属取代物，其脂肪酸酞化物，其高级醇醋化物或其烷基胺化物。
5.根据权利要求4所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：所述的SEQID NO：2氨基酸序列，根据全程cDNA推导出拟穴青蟹胰蛋白酶共259个氨基酸残基，分子量为28.15KDa，等电点pI为4.49。
6.根据权利要求1所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：所述的cDNA分子中包含8-100个连续核苷酸。
7.根据权利要求1所述的一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列，其特征在于：所述的cDNA分子转化的宿主细胞为真核细胞。
8.一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列的克隆，包括：
(1)从拟穴青蟹的肝胰腺提取总RNA；
(2)根据提取得到的RNA，构建cDNA质粒文库；
(3)cDNA文库的鉴定和测序；
(4)根据BLAST对比，获得如SEQ ID NO：1所示的序列。
9.一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列在预测青蟹种苗饵料投喂量的应用。
10.一种拟穴青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列在预测青蟹蜕壳周期中的应用。
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