[发明专利]鸡pdx1多克隆抗体及应用

权利要求书

1.选择抗鸡pdx1多克隆抗体免疫原序列的方法，所述方法包括：

(a)从基因文库中查询鸡pdx1序列

(b)选择综合评分高的部位，所述综合评分高是指根据二级结构预测，预测有重复性的结构以及可及性、柔性、表位获得性、抗原性、亲水性和极性的值较高，露在分子表面的概率较大。

(c)针对鸡pdx1基因检索将所选择的部位的序列，选择在所述pdx1基因中无其它相似序列的序列作为所述免疫原序列。

2.权利要求1的方法，所述查询针对GENBANK上鸡pdx1序Gene ID：771348进行。

3.权利要求1中的方法所选择的免疫原多肽，其选自：

(a)CVVSSGKLQGKEDLQP(SEQ ID NO：1)；

(b)通过取代、缺失、和/或添加一个或几个氨基酸从(a)的序列衍生的序列，其具有免疫原性；

(c)CDKKRGTANSADPEQD(SEQ ID NO：2)；

(d)通过取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸从(b)的序列衍生的序列，其具有免疫原性。

4.权利要求1中的免疫原序列在制备抗鸡pdx1多克隆抗体中的用途。

5.用权利要求1-3中任一项所述的免疫原序列免疫动物(优选为兔)后获得的抗pdx1多克隆抗体。

6.制备抗鸡pdx1多克隆抗体的方法，其包括：

(a)用权利要求1-3中任一项所述的免疫原序列免疫动物，优选免疫兔；

(b)采血及检测抗体效价；

(c)效价合格后采血并获得血清；

(d)纯化血清以获得所述多克隆抗体。

7.根据权利要求6的方法获得的pdx1多克隆抗体。

8.体外检测鸡胰腺干细胞的方法，其包括

(a)以权利要求5或7中的pdx1多克隆抗体为探针，结合荧光缀合的二抗；

(b)用免疫荧光染色法标记培养扩增的胰腺干细胞；

(c)对胰腺干细胞的相应抗原的表达进行定位；

9.检测胰腺干细胞，其中用权利要求5或7中的pdx1多克隆抗体通过免疫印迹法检测其相应抗原在培养扩增的胰腺干细胞及其他相关细胞中的表达。

10.权利要求5或7中的pdx1多克隆抗体在检测鸡胰腺干细胞中的用途。