[发明专利]一种禽流感灭活疫苗及其制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种禽流感灭活疫苗及其制造方法，属于动物用生物制品技术的领域。

背景技术

禽流感(Bird Flu或Avian Influenza)是由禽流感病毒引起的一种急性传染病，也能感染人类，人感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高，通常人感染禽流感死亡率约为33％。此病可通过消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等多种途径传播，区域间的人员和车辆往来是传播本病的重要途径。

禽流感是禽流行性感冒的简称，它是一种由甲型流感病毒的一种亚型(也称禽流感病毒)引起的传染性疾病，被国际兽疫局定为甲类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。按病原体类型的不同，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性禽流感三大类。非致病性禽流感不会引起明显症状，仅使染病的禽鸟体内产生病毒抗体。低致病性禽流感可使禽类出现轻度呼吸道症状，食量减少，产蛋量下降，出现零星死亡。高致病性禽流感最为严重，发病率和死亡率均高，人感染高致病性禽流感死亡率约是60％，家禽鸡感染的死亡率几乎是100％，无一幸免。

禽流感是世界范围分布的，1994年、1997年、1999年和2003年分别在澳大利亚、意大利、中国香港、荷兰等地爆发，2005年则主要在东南亚和欧洲爆发。除鸡群中的禽流感主要发生在冬、春季节外，没有其他明显的规律性。高致病性禽流感疫情的蔓延引起世界关注。

禽流感病毒(Avian Influenza virus，AIV)属甲型流感病毒。流感病毒属于RNA病毒的正黏病毒科，分甲、乙、丙3个型。其中甲型流感病毒多发于禽类，一些亚型也可感染猪、马、海豹和鲸等各种哺乳动物及人类。甲型流感病毒呈多形性，其中球形直径80～120nm，有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(HA)/和神经氨酸酶(NA)蛋白抗原性的不同，目前可分为15个H亚型(H1～H15)和9个N亚型(N1～N9)。

有研究表明，原本为低致病性禽流感病毒株(H5N2、H7N7、H9N2)，可经6～9个月禽间流行的迅速变异而成为高致病性毒株(H5N1)。这种现象的出现正是由于甲型流感病毒所具有的HA和NA二者的遗传性或抗原性漂移及遗传性或抗原性转移导致的抗原性变异所致(陆承平主编.兽医微生物学 第四版.中国农业出版社，1980.)。

1997年在香港发现H9N2禽流感病毒也可以由禽直接传染给人。1992年在我国华南地区已发现H9亚型，1994年分离的代表株为A/chicken/Beijing1/94(H9N2)，直到1998年前后，才在河北及京津地区的鸡群造成广泛流行。研究表明，流行的病毒是从1994年的分离株进化而来，具有气溶胶传播的新特点，因此传播率大大提高(陆承平主编.兽医微生物学第四版.中国农业出版社，1980.)。

发明内容

本发明的目的是利用本发明人分离的一株H9亚型禽流感病毒制备出灭活疫苗用于鸡预防H9亚型禽流感。

本发明所涉及的禽流感灭活疫苗系用本发明人由我国分离到并经过系统鉴定的一株H9亚型禽流感病毒接种鸡胚培养，收获感染胚液，用甲醛溶液灭活、混合，加常规油佐剂乳化制成。

本发明的详细描述

1病毒株来源

H9亚型HN307株禽流感病毒是本发明人由我国一个发病鸡场的发病鸡群采集的病料中分离到，经本发明人实验室检验和鉴定，后经国家禽流感研究中心进行了鉴定，确诊为禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)H9亚型，命名为HN307株，本病毒已于2010年02月02日送交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，保藏号CGMCC No.3598。

2病毒株特性

(1)血凝抑制试验  按“中国兽药典”HI试验方法，配制4单位HN307株病毒液，然后用四种阳性血清进行交叉试验。该病毒凝集红细胞的特性能被禽流感H9阳性血清特异性中和，不能被ND、EDS及H5阳性血清中和。HN307株病毒第1代HA价为7log2，传至第2代HAHA≥8log2上升为8log2(AIV H9及H5阳性血清购自哈尔滨兽医研究所)。