[发明专利]用于指导易瑞沙、特罗凯类药物个体化治疗的基因组合

说明书

技术领域

本发明属于基因技术领域，涉及一组用于指导易瑞沙、特罗凯类药物个体化治疗的基因组合。

背景技术

表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶介导的细胞生长信号通路在癌症的形成和发展中起重要作用。EGFR在许多不同的实体瘤患者中过表达，包括非小细胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌。卵巢癌、头颈癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌和胶质细胞瘤等，常与预后不良。放化疗抗性、肿瘤血管形成和肿瘤的转移有关，已成为肿瘤治疗的理想靶点。近年来，许多以此为靶点的新抗肿瘤药物陆续被开发，在多种肿瘤治疗中取得了令人鼓舞的疗效。

易瑞沙(Iressa/吉非替尼/Gefitinib，阿斯利康)和特罗凯(Tarceva/厄罗替尼/Erlotinib，罗氏制药)作为表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，是美国FDA批准用于NSCLC靶向治疗的主要药物。但是，临床试验表明易瑞沙和特罗凯仅对10-30％的NSCLC病人有显著疗效。进一步的研究发现EGFR酪氨酸激酶区基因突变是NSCLC靶向治疗药物奏效的一个必要前提条件，而且绝大多数携带EGFR基因突变的病人疗效显著。因此，检测EGFR基因突变成为NSCLC病人是否接受靶向治疗的重要依据。

EGFR：EGFR与配体结合后激活酪氨酸激酶区，结合1个ATP分子，自身发生磷酸化和转磷酸化作用，使受体酪氨酸残基磷酸化，然后将信号传入细胞内。EGFR不但能调节正常细胞的增殖分化，而且在调节肿瘤细胞的生长、修复和转移中也具有重要的作用。EGFR的突变主要发生在外显子18-21，其中19和21两外显子突变率可达到90％。19外显子碱基缺失主要发生在746-750位的氨基酸，这个位子是ATP结合的关键部位，突变改变了受体ATP结合位点(ATP-binding pocket)的角度，明显的增加了癌细胞对EGFR抑制剂如特罗凯和易瑞沙的敏感性。21外显子点突变表现为858位密码子的亮氨酸转变为精氨酸(L858R)，此突变位点紧邻激酶活化环中高度保守的DFG序列附近，使活化环的稳定性提高，也明显增强癌细胞对EGFR抑制剂的敏感性。美国FDA批准对拟采用易瑞沙、特罗凯等EGFR-TKI治疗的病人，进行EGFR基因突变检测。

Kras：ras基因家族与人类肿瘤相关的基因有三种：H-ras、K-ras和N-ras，分别定位在11、12和1号染色体上。其中，K-ras对人类癌症影响最大，它好像分子开关，当正常时能控制调控细胞生长的路径；发生异常时，则导致细胞持续生长，并阻止细胞自我毁灭。

Kras突变基因检测能确定是否适合进行表皮生长因子受体抑制剂这类药物的个体化治疗，通常情况下，60％左右的结直肠癌病人的K-ras基因都是野生型的，这样在化疗基础上加上表皮生长因子受体抑制剂，如爱必妥，有效率可以达到60％左右，延长病人生命。而突变型的病人则不适合进行单抗药物的治疗。K-ras基因突变的最常见的方式是点突变，多发生在N端第12、13和61密码子，其中又以第12密码子突变最常见，而且多为GGT突变成GTT。

Kras基因突变检测已被美国癌症综合网络(NCCN)列为《结肠癌临床治疗指南》与《直肠癌临床治疗指南》临床用药必检项目。

药物代谢和效应的个体化差异：临床上，同样药物的剂量对病人甲有效，对病人乙可能不起作用，对病人丙则可能有副作用。在药物疗效与副作用方面，病人的反应差异很大。因此，在对肿瘤病人进行化疗时，如果先对其相关基因位点进行检测，再根据其基因突变情况进行治疗，就可以对病人实施个体优化治疗。

因此，通过检测病人肿瘤组织中的EGFR-Exon19，EGFR-Exon21，Kras-codon12/13，Kras-codon61基因位点的突变情况，对拟采用易瑞沙、特罗凯等EGFR-TKI治疗的病人进行药物敏感指导，可以使疗效达到最大，副作用降到最低。

现有临床用药方法的缺陷：在很多疾病的治疗过程中，常发生用药不当而导致副作用或因剂量不足无法达到治疗目的。因此针对这些病患的基因型进行个体化用药具有特别重要的意义。以前，医生如果需要调整病人的用药，需要长时间观察，病人也需要做大量的检测。这种调整用药的过程程序复杂，费时，延误治病时机。