[发明专利]一种调控微生物代谢脂肽化合物组成的方法有效

专利信息
申请号: 201010107949.3 申请日: 2010-02-09
公开(公告)号: CN101775427A 公开(公告)日: 2010-07-14
发明(设计)人: 牟伯中;杨世忠;刘金峰;杨娟 申请(专利权)人: 华东理工大学
主分类号: C12P21/04 分类号: C12P21/04;C12R1/125
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人: 林君如
地址: 200237*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 调控 微生物 代谢 化合物 组成 方法
【权利要求书】:

1.一种调控微生物代谢脂肽化合物组成的方法,其特征在于,该方法包 括以下步骤:

(1)基础培养基预处理:向基础培养基中加入氨基酸组成介质;

基础培养基组成为蔗糖20.0g/L,(NH4)2SO42.0g/L,KH2PO46.0g/L, Na2HPO4·12H2O 6.0g/L,MgSO40.3g/L,酵母粉0.5g/L,CaCl20.001g/L, CoCl2·6H2O 0.018g/L,NiCl2·6H2O 0.007g/L,CuCl2·2H2O 0.002g/L及FeSO4·7H2O 0.083g/L;

(2)培养微生物:将微生物置于由基础培养基和氨基酸组成的介质中培 养,微生物的加入量为介质的2%(v/v),控制培养温度为37℃,培养时间为 72h,得到微生物的发酵液,其中微生物为市售的Bacillus subtilis TD-7;

(3)收获脂肽:采用酸化-沉淀分离-浸提的方法处理步骤(2)中得到的 微生物的发酵液,将除细胞后的发酵液用盐酸或硫酸调节pH至2.0,再通过离 心收集沉淀,沉淀采用无水乙醚浸提,最后除去无水乙醚即获得脂肽;

步骤(1)的氨基酸选自丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬 氨酸(Asp)、巯基丙氨酸(Cys)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)、组 氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、苯基丙 氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr) 及缬氨酸(Val),各氨基酸的加入量均为1.0g/L;其中,在培养基中加入Arg, Gln或Val能显著提高含偶数碳的β-羟基脂肪酸的surfactin的含量,而加入Cys、 His、Ile、Leu、Met、Ser或Thr则会显著提高含奇数碳数的β-羟基脂肪酸的 surfactin的含量,加入Ala、Asn、Asp、Glu、Gly、Phe、Pro、Trp或者Tyr并 不能显著影响脂肪酸部分的组成。

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