[发明专利]一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法无效
申请号: | 201010108118.8 | 申请日: | 2010-02-09 |
公开(公告)号: | CN101899500A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
发明(设计)人: | 陈宏;马亮;蓝贤勇;李转见;王景;淮永涛;雷初朝;胡沈荣 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄牛 klf7 基因 核苷酸 多态性 检测 方法 | ||
1.一种快速检测黄牛KLF7基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以包含KLF7基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P1、P2、P3等摩尔比的混合物为引物,PCR扩增黄牛KLF7基因;用限制性内切酶TaqI消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛KLF7基因第41401、42025、42075位的单核苷酸多态性;
所述的引物对P1为:
上游引物F1:tgcttctgat ggctgtttct c;
下游引物R1:aggaaacagt ccaagtcctc atc;
所述的引物对P2为:
上游引物F2:acggcacagt gacgttgaa;
下游引物R2:gaacagagag aagcccttcc cccctc;
所述的引物对P3为:
上游引物F3:ctgttccgag aagtggcatc catgccatc;
下游引物R3:actacaccaa ggctggcact。
2.如权利要求1所述的一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:95℃预变性5min;94℃变性30s,57.0℃退火35s,72℃延伸35s,30~35个循环;72℃延伸10min。
3.如权利要求1所述的一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法,其特征在于,所述的琼脂糖凝胶电泳为质量浓度为3%的琼脂糖凝胶电泳。
4.如权利要求1所述的黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性为:
第41401位的多态性为:C1C1基因型表现为104和24bp条带,C1T1基因型表现为128、104和24bp条带,T1T1基因型表现为128bp条带;
第42025位的多态性为:T2T2基因型表现为337bp条带,T2C2基因型表现为337、310和27bp条带,C2C2基因型表现为310和27bp条带;
第42075位的多态性为:A3A3基因型表现为182bp条带,A3G3基因型表现为182、154和28bp条带,G3G3基因型表现为154和28bp条带。
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