[发明专利]一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法

权利要求书

1.一种快速检测黄牛KLF7基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

以包含KLF7基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3等摩尔比的混合物为引物，PCR扩增黄牛KLF7基因；用限制性内切酶TaqI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛KLF7基因第41401、42025、42075位的单核苷酸多态性；

所述的引物对P1为：

上游引物F1：tgcttctgat ggctgtttct c；

下游引物R1：aggaaacagt ccaagtcctc atc；

所述的引物对P2为：

上游引物F2：acggcacagt gacgttgaa；

下游引物R2：gaacagagag aagcccttcc cccctc；

所述的引物对P3为：

上游引物F3：ctgttccgag aagtggcatc catgccatc；

下游引物R3：actacaccaa ggctggcact。

2.如权利要求1所述的一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：95℃预变性5min；94℃变性30s，57.0℃退火35s，72℃延伸35s，30～35个循环；72℃延伸10min。

3.如权利要求1所述的一种黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性检测方法，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶电泳为质量浓度为3％的琼脂糖凝胶电泳。

4.如权利要求1所述的黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛KLF7基因的单核苷酸多态性为：

第41401位的多态性为：C₁C₁基因型表现为104和24bp条带，C₁T₁基因型表现为128、104和24bp条带，T₁T₁基因型表现为128bp条带；

第42025位的多态性为：T₂T₂基因型表现为337bp条带，T₂C₂基因型表现为337、310和27bp条带，C₂C₂基因型表现为310和27bp条带；

第42075位的多态性为：A₃A₃基因型表现为182bp条带，A₃G₃基因型表现为182、154和28bp条带，G₃G₃基因型表现为154和28bp条带。