[发明专利]一种检测牛奶中青霉素残留量的方法

权利要求书

1.一种检测牛奶中青霉素残留量的方法，包括以下步骤：

(1)青霉素的降解及荷移复合物的形成：配制青霉素钠浓度0.01～ 100mg/L的标准工作无水乙醇液，用稀HCl调至pH 2±0.5，沸水浴10～30min 使其降解，得到降解产物青霉胺，降解产物再与浓度为1×10^-3～10× 10^-3mol/L的苯醌类物质在常温下反应5～10min，得到青霉胺荷移复合物， 备用；或是将标准工作无水乙醇液用稀HCl调至pH 4±0.5，沸水浴10～30 min使其降解，得到降解产物青霉烯酸，降解产物再与浓度为1×10^-3～10× 10^-3mol/L的苯醌类物质在常温下反应5～10min，得到青霉烯酸荷移复合物， 备用；

(2)测定波长的选择：将步骤1得到的青霉胺荷移复合物在紫外分光 光度计下测定紫外最大吸收波长，或是将得到的青霉烯酸荷移复合物在荧光 分光光度计下测定荧光的激发和发射光谱；其中，所述的紫外吸收或是荧光 的激发发射波长的测定选择范围为200nm～600nm；

(3)针对不同的荷移复合物分别计算吸收光强度与荷移复合物的线性 范围、回收率、标准偏差、检测限和工作曲线；

(4)样品前处理：将牛奶样品与脱蛋白、脱脂肪沉淀剂混合均匀，在 转速800～3000r/min条件下离心分离3～10min，取上清液备用；

(5)样品测定：取步骤4中的上清液，按照步骤1进行降解、荷移反 应，得到相应的荷移复合物，再按照步骤2的要求测定紫外最大吸收波长或 荧光的激发和发射光谱，计算该荷移复合物的吸收度，代入步骤3所得的该 类荷移复合物的工作曲线中即可求得牛奶中青霉素的残留量。

2.根据权利要求1所述的检测牛奶中青霉素残留量的方法，其特征在 于：步骤(1)中，以水、甲醇、乙醇、异丙醇或丙酮中的一种作为反应介 质；所述的苯醌类物质为苯醌、甲氧基苯醌、四氯苯醌或四氰基对二次甲基 苯醌中的一种。

3.根据权利要求1所述的检测牛奶中青霉素残留量的方法，其特征在 于：步骤(4)中所述的脱蛋白、脱脂肪沉淀剂选自pH2的酸性乙腈、三氯 乙酸、钨酸钠、醋酸钠或醋酸铅中的一种。

4.根据权利要求3所述的检测牛奶中青霉素残留量的方法，其特征在 于：当使用酸性乙腈或三氯乙酸时将其与牛奶等体积混合；使用钨酸钠、醋 酸钠或醋酸铅时按牛奶重量的2～10％重量百分数混合。