[发明专利]灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法有效
申请号: | 201010109669.6 | 申请日: | 2010-02-10 |
公开(公告)号: | CN101839863A | 公开(公告)日: | 2010-09-22 |
发明(设计)人: | 黄金宝;贾福怀;邢晓伟 | 申请(专利权)人: | 宁波御坊堂生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N1/34 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 胡志萍 |
地址: | 315010 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 灵芝 螺旋藻 多糖 提取 测定 方法 | ||
1.一种灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法,其步骤包括:
1)称取样品细粉0.5~1.0g,加入30~60倍重量的浓度为80~100%乙醇溶液,振荡搅拌均匀,超声提取20~40min,离心弃去液体;
2)将步骤1中得到的沉淀物再加入30~60倍重量的浓度为80~100%的乙醇溶液,振荡搅拌均匀,超声提取20~40min,离心弃去液体;
3)将步骤2中得到的沉淀物加入30~100倍重量的纯化水后,在70~100℃的水浴中提取1~3h,过滤,将滤液转移到100ml容量瓶中,再将残渣洗涤2~4次,该多次洗涤的溶液一并转移到容量瓶中定容,摇匀,作为样品溶液,该样品溶液仅含有灵芝螺旋藻中的多糖;
4)用硫酸苯酚法测出样品溶液中多糖的含量。
2.如权利要求1所述的灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法,其特征在于所述样品为灵芝螺旋藻片。
3.如权利要求1所述的灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法,其特征在于所述的乙醇溶液浓度为80%。
4.如权利要求1所述的灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法,其特征在于所述水浴温度为100℃。
5.如权利要求1所述的灵芝螺旋藻中粗多糖的提取和测定方法,其特征在于所述硫酸苯酚法的具体步骤为:
1)吸取1ml样品溶液置于20ml具塞试管中,加入1.0ml浓度为5%的苯酚溶液,然后快速加入5.0ml的浓硫酸,静置10min后,振荡并且充分混匀,置30℃水浴中反应20min,使用紫外分光光度仪于490nm处测吸光度;
2)测定标准品溶液:精密称取干燥至恒重的葡萄糖或葡聚糖标准品,制成0.1mg/ml的标准品溶液,分别取0、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml体积的该标准品溶液置于20ml具塞试管中并分别补蒸馏水至1.0ml,同样再加入1.0ml浓度为5%的苯酚溶液,然后快速加入5.0ml浓硫酸,静置10min后,振荡并且充分混匀,置30℃水浴中反应20min,使用紫外分光光度仪在490nm处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,标准品溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线,得回归方程;
3)将步骤1)中得到的样品溶液的吸光度代入回归方程,计算样品溶液中粗多糖的含量,通过换算可得样品中粗多糖的含量。
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