[发明专利]田蓟苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取物制备和应用领域，具体涉及一种田蓟苷的制备 方法及其应用。

背景技术

香青兰为唇形科植物香青兰(Dracocephalum Moldevica L.)的干燥地 上部分，夏季盛花期采割，除去杂质，晒干。花多萎缩，蓝紫色。气清香， 叶微辛。香青兰含有大量的黄酮类化合物，如田蓟苷(Tilianin)、藿香苷 (Agastachoside)、木犀草素-7-O-葡萄糖苷(Luteolin-7-O-glucoside)、木 犀草素(Luteolin)、山奈酚(Kaempferol)、异鼠李素(Isorhamnetin)等。 文献报道，其中，黄酮苷类化合物田蓟苷含量较高。

田蓟苷(tilianin)有显著扩张冠状动脉的作用，可用于制备治疗心血 管疾病，特别是抗心肌缺血的药物。虽然黄酮苷类化合物中田蓟苷含量较高， 但目前还没有得到很好的分离和提纯，也无市售的田蓟苷纯品。

综上，需要提供一种田蓟苷的制备方法，增加其纯度。

发明内容

为解决上述至少一个技术问题，本发明提供了一种制备高纯度田蓟苷 的方法，同时提高了从香青兰中提取田蓟苷的得率。

为实现上述发明目的，本发明提供的田蓟苷的制备方法，包括以下步 骤：(a)将香青兰地上部分，用10～40重量倍数的20～60vol％的醇溶液 提取，得到提取液；(b)浓缩、干燥所述提取液，得到浸膏粉；(c)使 用有机溶剂萃取所述浸膏粉，得到萃取液；(d)浓缩所述萃取液后，进行 硅胶柱层析，流动相采用复合洗脱剂，所述复合洗脱剂由A组分和B组分 构成，所述A组分选自下述组中的至少一种：甲醇、乙醇、丙酮、异丙酮 或丁醇，所述B组分选自下述组中的至少一种：氯仿、乙酸乙酯、二氯甲 烷或二氯乙烷，所述A组分与B组分的体积比为90∶10～10∶90，进行梯 度洗脱得到洗脱液；以及(e)合并相同组分洗脱液，浓缩，得到所述田蓟 苷。

本发明所提供的方法操作简便，提取效率高，所得田蓟苷的纯度不低 于98％，可用于制备治疗心血管疾病的药物，如治疗冠心病、心肌梗死、 心肌缺血等症，特别是对缺血心肌的保护，药效明显，质量可控性强。

根据本发明所提供的方法，步骤a所述醇溶液选自下述组中的至少一种： 甲醇、乙醇或丙醇，提取时间为1～7h。

黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在，而在 木部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。黄酮苷类以及极性稍大的苷 元(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)，一般可用丙酮、醋酸乙酯、 乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。经反复实验发现，本发明 所述田蓟苷难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，在对香青兰 进行提取时，可以用20～60vol％的醇溶液进行提取，其中，以乙醇溶液的 提取效果较好。

根据本发明，步骤b所述浓缩为减压浓缩，所述干燥为真空干燥，在 此条件下浓缩和干燥的效果均可在不破坏田蓟苷有效成分的前提下达到最 佳。

根据本发明的实施方式之一，步骤c所述有机溶剂选自下述组中的至少 一种：乙酸乙酯、甲苯、四氯化碳、乙醚、氯仿、溴苯或二氯甲烷，萃取 次数为2～6次。

利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行萃取可 达到精制纯化目的。研究人员发现，在制备田蓟苷的过程中，上述有机溶 剂均能达到分离田蓟苷的效果，其中，选用乙酸乙酯进行萃取效果较好， 在除去杂质的同时，还起到了分离苷和苷元、极性苷元与非极性苷元的效 果，从而使得田蓟苷分离效果较好。

根据本发明所提供的方法，步骤d中采用的硅胶为100～200目的层析 用硅胶H。根据本发明实施方式之一，浓缩后的所述萃取液与所述层析用 硅胶H的重量比为1∶30～70。

硅胶H不含粘合剂，根据实验结果用于田蓟苷的分离效果最好，分离 度较高。

硅胶柱层析流动相，依据所分离的提取物极性不同，可选用乙酸乙酯- 丙酮、环己烷-丙酮、乙酸乙酯-石油醚、甲醇-氯仿、正丁醇-醋酸、四氯 化碳-乙腈等，经研究发现，田蓟苷的分离中，采用乙酸乙酯-丙酮、氯仿- 甲醇作为流动相分离效果较好。