[发明专利]配制荧光原位杂交的杂交液和洗涤液的方法无效
申请号: | 201010112881.8 | 申请日: | 2010-02-23 |
公开(公告)号: | CN101792803A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
发明(设计)人: | 吴晓磊;汤岳琴;池昌桥;郭鹏 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100080 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 配制 荧光 原位杂交 杂交 洗涤液 方法 | ||
1.一种配制如下荧光原位杂交的杂交液的方法:由NaCl、SDS、Tris-HCl、去离 子甲酰胺和水组成,NaCl的终浓度为N1mol/L,SDS的终浓度为N2%(质量百分含量), Tris-HCl的终浓度为N3mmol/L,去离子甲酰胺的终浓度为X%(质量百分含量);其特 征在于:将溶液A、溶液B、溶液C、溶液D和水混合,得到所述杂交液;所述溶液A 由NaCl和水组成,NaCl的终浓度为M1mol/L;所述溶液B由SDS和水组成,每100mL 溶液B含有M2g SDS;所述溶液C由Tris和水组成,Tris的终浓度为M3mol/L;所 述溶液D为去离子甲酰胺;所述溶液A、所述溶液B、所述溶液C、所述溶液D和水的 体积比=(N1/M1)∶(N2/M2)∶(N3/1000M3)∶(X/100)∶(1-N1/M1-N2/M2- N3/1000M3-X/100);
N1=0.9,N2=0.01,N3=20;所述溶液A、所述溶液B、所述溶液C、所述溶液D和 水的体积比=40∶1∶4∶2X∶(155-2X);
X为5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或60。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述溶液A中,NaCl的终浓度为 3-5mol/L;每100mL所述溶液B含有2-10g SDS;所述溶液C中,Tris的终浓度为 0.5-1.5mol/L。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述溶液A的制备方法如下:将NaCl 溶于水得到溶液A,NaCl的终浓度为4.5mol/L;所述溶液B的制备方法如下:将SDS 溶于水得到溶液B,每100mL溶液B含有2g SDS;所述溶液C的制备方法如下:将Tris 溶于水,用盐酸调节pH为7.2,得到溶液C,Tris的终浓度为1mol/L。
4.一种配制如下荧光原位杂交的洗涤液的方法:由NaCl、SDS、Tris-HCl和水组 成,NaCl的终浓度为Y mmol/L,SDS的终浓度为S2%(质量百分含量),Tris-HCl的 终浓度为S3mmol/L;其特征在于:将溶液A、溶液B、溶液C和水混合,得到所述洗 涤液;所述溶液A由NaCl和水组成,NaCl的终浓度为M1mol/L;所述溶液B由SDS 和水组成,每100mL溶液B含有M2g SDS;所述溶液C由Tris和水组成,Tris的终 浓度为M3mol/L;所述溶液A、所述溶液B、所述溶液C和水的体积比=(Y/M1)∶ (1000S2/M2)∶(S3/M3)∶(1000-Y/M1-1000S2/M2-S3/M3);
S2=0.01,S3=20;所述溶液A、所述溶液B、所述溶液C和水的体积比=2Y∶45∶ 180∶(8775-2Y);
Y为636、450、318、225、159、112、80、56、40、28、20或14。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述溶液A中,NaCl的终浓度为 3-5mol/L;每100mL所述溶液B含有2-10g SDS;所述溶液C中,Tris的终浓度为 0.5-1.5mol/L。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于:所述溶液A的制备方法如下:将NaCl 溶于水得到溶液A,NaCl的终浓度为4.5mol/L;所述溶液B的制备方法如下:将SDS 溶于水得到溶液B,每100mL溶液B含有2g SDS;所述溶液C的制备方法如下:将Tris 溶于水,用盐酸调节pH为7.2,得到溶液C,Tris的终浓度为1mol/L。
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