[发明专利]治疗HCV病症的方法

说明书

本申请是申请日为2006年1月2日、优先权日为2005年1月4日的中国专利申请第200680001651.6号的分案申请。

技术领域

本发明涉及S1P受体调节剂或激动剂在丙型肝炎或慢性丙型肝炎中的用途。

背景技术及发明内容

S1P受体调节剂或激动剂通常为鞘氨醇类似物，例如2-取代的2-氨基-丙烷-1，3-二醇或2-氨基-丙醇衍生物，例如包含式X基团的化合物：

其中Z为H；C_1-6烷基；C_2-6链烯基；C_2-6炔基；苯基；被OH取代的苯基；被1-3个取代基取代的C_1-6烷基，所述的取代基选自卤素、C_3-8环烷基、苯基和被OH取代的苯基；或CH₂-R_4z，其中R_4z为OH、酰氧基或式(a)基团：

其中Z₁为直键或O，优选O；

R_5z和R_6z各自独立地为H或任选被1、2或3个卤素原子取代的C_1-4烷基；

R_1z为OH、酰氧基或式(a)基团；且R_2z和R_3z各自独立地为H、C_1-4烷基或酰基。

式X基团是作为端基与可以为亲水性或疏水性且包含一种或多种脂族、脂环族、芳族和/或杂环基团的部分连接的官能基，其程度为其中Z和R_1z中的至少一个为或包含式(a)基团的所得分子作为多种鞘氨醇-1-磷酸受体之一的激动剂传导信号。

S1P受体调节剂或激动剂为作为一种或多种鞘氨醇-1-磷酸受体如S1P1至S1P8的激动剂传导信号的化合物。例如，与S1P受体结合的激动剂可以导致胞内异三聚化G-蛋白解离成Gα-GTP和Gβγ-GTP和/或导致激动剂占据的受体的磷酸化增加和下游信号传导途径/激酶的活化。

可以在下列试验中测定S1P受体激动剂或调节剂与各种人S1P受体的结合亲和力：

在人S1P受体S1P₁、S1P₂、S1P₃、S1P₄和S1P₅上测试化合物的S1P受体激动剂或调节剂活性。通过对化合物诱导的GTP[γ-³⁵S]与膜蛋白的结合进行定量评价功能性受体活化，所述膜蛋白由稳定表达适当人S1P受体的转染CHO或RH7777细胞制备。所用的测定技术为SPA(基于亲近闪烁的测定法)。简言之，连续稀释DMSO溶解的化合物，在50mM Hepes、100mMNaCl、10mM MgCl₂、10μM GDP、0.1％不含脂肪的BSA和0.2nM GTP[γ-³⁵S](1200Ci/mmol)存在下加入到SPA-珠(Amersham-Pharmacia)固定的表达膜蛋白的S1P受体中(10-20μg/孔)。于RT在96孔微量滴定板中孵育120分钟后，通过离心步骤分离未结合的GTP[γ-³⁵S]。用TOPcount平板读数仪(Packard)对膜结合GTP[γ-³⁵S]引起的SPA珠发光进行定量。使用标准曲线拟合软件计算EC₅₀。在本测定法中，优选S1P受体调节剂或激动剂的与S1P受体的结合亲和力＜50nM。

优选的S1P受体激动剂或调节剂例如为除其S1P结合特性外还具有加速淋巴细胞归巢特性的化合物，例如引起由淋巴细胞由循环至次级淋巴组织的再分布、优选可逆的再分布导致的淋巴细胞减少的化合物，不引起全身免疫抑制。分离原初细胞；刺激来自血液的CD4和CD8T-细胞和B-细胞以迁移入淋巴结(LN)和派尔斑(PP)。

可以在下述血液淋巴细胞消减试验中测定淋巴细胞归巢特性：

通过对大鼠管饲口服施用S1P受体激动剂或调节剂或载体。在-1天获得用于血液监测的尾血以得到基线个体值，并在施用后2、6、24、48和72小时获得用于血液监测的尾血。在本试验中，当以例如＜20mg/kg的剂量给药时，S1P受体激动剂或调节剂使外周血液淋巴细胞消减例如50％。

适宜的S1P受体调节剂或激动剂的实例例如有：

-如EP627406A1中公开的化合物，例如式I化合物，

其中