[发明专利]利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法

权利要求书

1.一种利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于将微生物碳酸酐酶加入含有钙离子溶液的反应体系中，在室温下进行振荡反应，初始pH控制在5～10，将产生的沉淀取出，过滤、洗涤、烘干，得到碳酸钙。

2.根据权利要求1所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于所述的碳酸酐酶可以是胞外碳酸酐酶、胞内碳酸酐酶或胞内胞外碳酸酐酶的混合物。

3.根据权利要求1和2所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于碳酸酐酶的制备方法如下：(1)胞外碳酸酐酶采用如下制备方法：在添加10μM硫酸锌的培养基中接种微生物，在30℃下振荡培养18～24小时，培养液冷冻离心，收集上清液，菌体冷藏备用，上清液用饱和硫酸铵盐析后离心取蛋白沉淀，蛋白沉淀溶解于磷酸盐缓冲液中，过G100凝胶柱，收集酶活性高的部分，透析，透析液过DEAE-纤维素离子交换柱，收集酶活性高的部分，再透析获得胞外碳酸酐酶溶液；(2)胞内碳酸酐酶采用如下制备方法：取前述的菌体，加入磷酸盐缓冲液，在冰浴条件下研磨后冷冻离心，取上清液，随后步骤同前面所述的胞外碳酸酐酶的制备方法，从而获得胞内碳酸酐酶溶液；(3)混合碳酸酐酶采用如下制备方法：在添加10μM硫酸锌的培养基中接种微生物，在30℃下振荡培养18～24小时，培养液在0～4℃用闪式提取器或球磨机进行菌体破碎，冷冻离心，取上清液，将上清液用饱和硫酸铵盐析，随后步骤同前面所述的胞外碳酸酐酶的制备方法。

4.根据权利要求3所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于，所述的微生物是蜡样芽孢杆菌。

5.根据权利要求1或2所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于所述的反应体系可以为(1)含有钙离子和碳酸氢根离子溶液的液体体系或(2)含有钙离子溶液且利用碳酸氢铵溶液释放CO₂的气体扩散体系。

6.根据权利要求3所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于所述的反应体系可以为(1)含有钙离子和碳酸氢根离子溶液的液体体系或(2)含有钙离子溶液且利用碳酸氢铵溶液释放CO₂的气体扩散体系。

7.根据权利要求4所述的利用微生物碳酸酐酶催化制备碳酸钙的方法，其特征在于所述的反应体系可以为(1)含有钙离子和碳酸氢根离子溶液的液体体系或(2)含有钙离子溶液且利用碳酸氢铵溶液释放CO₂的气体扩散体系。