[发明专利]一种发酵生产阿魏菇多糖及其口服液的方法

权利要求书

1.一种基于阿魏菇生物学特性的发酵生产阿魏菇多糖罐批发酵方法，其特征在 于：母种的斜面培养：用无菌接种钩刮取少量阿魏菇菌丝体，接种到PDA斜 面培养基上，在28℃培养7d；原种的种瓶培养：用无菌接种钩挑取一定量的 斜面菌丝块，接种到装有350mL种瓶培养基的500mL广口瓶中，28℃恒温 静置培养15d，其中，种瓶培养基的质量体积比为：木屑粉30％、麸皮粉7 ％、白砂糖0.5％、石膏0.5％、石灰2％，其余为无菌水；种液的150L-1500L 种子罐扩大培养：菌丝体长满种瓶后，用无菌接种铲将菌丝块搅碎并瓶于装 有1500mL无菌水的2000mL三角瓶中，然后加入0.2％的土霉素抑止杂菌污 染，按1∶20的接种量接种于装有100L种液培养基一的150L气升式发酵罐中， 通气充分搅拌培养，28℃发酵96小时，接着按10％的接种量接入装有1000L 种液培养基二的1500L搅拌釜式发酵罐中扩培，25℃恒温培养96h，其中， 150L、1500L搅拌釜式发酵罐的搅拌转速分别为200r/min和160r/min、空气 流量分别为12m³/h和120m³/h，种液培养基一的质量体积比为：小麦粉1.5％、 蔗糖1.0％、酵母膏0.4％、麸皮需煮汁1.5％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％， 种液培养基二的质量体积比为：小麦粉0.7％、蔗糖0.7％、酵母膏0.28％、 麸皮需煮汁1.0％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％，pH值灭菌前均自然，121℃ 灭菌30min；10m³发酵罐发酵培养：将经过扩培的发酵液按1∶10的比例接种 于装有7m³发酵培养基的10m³搅拌釜式发酵罐中，28℃恒温发酵120h后结 束发酵；其中，搅拌转速为120r/min、空气流量为840m³/h，发酵培养基的质 量体积比为：小麦粉0.5％、蔗糖0.5％、酵母膏0.2％、麸皮需煮汁0.7％、 KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％，pH值灭菌前自然，121℃灭菌30min。

2.一种基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌体细胞结构组成特点的发酵生产阿 魏菇多糖后提取方法，其特征在于：发酵产物的预处理：将权利要求1中所 述方法经过罐批发酵获得的发酵产物50L装入200目的过滤袋中置于SS800 三足式离心机中，在1200r/min的转速下离心30min，再按料液比1∶1.5加入 无水乙醇，在上述相同工作转速下离心30min，收集干菌体，然后将得到的干 菌体50kg平均装入4个25L球磨罐中置于QM-2SP100-GL球磨机中，在 700r/min的转速下破壁30min，收集破碎菌体；阿魏菇多糖的连续提取及浓缩： 将经过预处理的发酵产物130kg按料液比1∶5加入650L经过去离子处理的自 来水平均打入700L1、2号提取罐中，经过功率6KW的超声波处理5min后， 在100℃的提取温度、50r/min的转速下搅拌提取60min，然后将1号罐中的 提取液放入暂存罐中，关闭阀门再将2号提取罐的提取液打入1号提取罐中， 暂存罐中的提取液打入2号提取罐中，在上述相同的提取条件下搅拌提取 60min，接着将提取液放入暂存罐中，开启减压阀门在0.08MPa的负压下提取 液被倒吸入2.5m²刮膜式旋转蒸发器中在95℃、200r/min减压浓缩，蒸发的 水蒸气经过10m²冷凝器在0℃液化回收到1.5m³溶剂回收罐中，得到的浓缩 物打入醇析罐中结晶；低温醇析：将得到的浓缩物按料液比1∶5打入装有150L 无水乙醇的200L醇析罐中在-4℃结晶12h，然后放入12-15个孔径38μm的尼 龙袋中挂于300L存储罐中过滤24h，将得到的结晶物倒入30L不锈钢桶中以 备后续脱溶；两步脱溶：称量30kg结晶物倒入脱溶锅中，在60℃的脱溶温度、 0.08MPa工作压力下减压脱溶2h；然后从脱溶锅底部通入N₂，在上述相同的 条件下减压脱溶1.5h，最后，收集阿魏菇菌丝体粗多糖，以备阿魏菇多糖口 服液深加工产品添加之用。