[发明专利]全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法

权利要求书

1.一种全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征在于以氯化胆碱和磷酸根离 子为底物，以葡萄糖为能量供体，加入小分子化学效应物质，利用有透性的微生物细胞 生物催化合成磷酸胆碱；

其中，所述的有透性的微生物细胞是指通过化学、物理或生物方法处理过的细胞膜 的通透性改变过的微生物细胞；

所述的微生物细胞是指能够利用氯化胆碱合成磷酸胆碱的微生物；

所述的小分子化学效应物质为锌离子和半胱氨酸的组合物。

2.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征在于底物 中，氯化胆碱的起始反应浓度为10～500mmol/L，磷酸根离子的起始反应浓度为 0.1～2mol/L。

3.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征在于葡萄 糖的起始反应浓度为0.1～1mol/L。

4.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征在于锌离 子的起始反应浓度为1～200mmol/L，半胱氨酸起始反应浓度为1～50mmol/L。

5.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征在于微生 物细胞的使用量为按湿菌体100～800g/L。

6.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征是所述的 化学、物理或生物方法是表面活性剂法、有机溶剂法、冻融法、超声波处理法、风干法 或冷冻干燥法。

7.根据权利要求6所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征是表面活 性剂法中使用的表面活性剂为非离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂或者阴离子表 面活性剂，使用量为0.1～50g/L。

8.根据权利要求6所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征是有机溶 剂法中使用的有机溶剂为二甲苯、甲苯、脂肪醇、丙酮或乙酸乙酯，使用量为0.1～ 50mL/L。

9.根据权利要求1至7中任意一项所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法， 其特征在于磷酸胆碱的生成反应在水溶液中进行，pH4.0～10.0，20℃～40℃条件下反应 4～30小时。

10.根据权利要求1所述的全细胞生物催化合成磷酸胆碱的方法，其特征是，所述 的微生物细胞是气杆菌属、埃希氏菌属、赛氏杆菌属或微球菌属的细菌；酵母属、假丝 酵母属、毕赤酵母属、球拟酵母属、德巴利酵母属、接合酵母属、克鲁维酵母属、汉逊 酵母属或酒香酵母属的酵母。