[发明专利]非金属胶体粒子免疫分析试剂及分析方法

说明书

技术领域

本发明属于诊断免疫分析技术领域。

背景技术

已知的很多诊断免疫分析方法主要是利用带有可追踪标记的特异性抗体能够与分析物特异性结合的特性来检测分析物的含量，例如放射免疫分析法(RIA)、自由基检测技术(FRAT)、酶联免疫技术(EIA)、免疫荧光技术以及金属溶胶颗粒检测分析物的方法(专利申请号为4313734的美国专利中介绍了该方法)。

现有技术中，上述的这些方法都在使用，都能够有效检测一些特定的分析物，但是上述这些方法都存在一些弊端，例如，放射免疫分析法虽然灵敏度高，但是需要使用有放射性的化合物，操作危险，对操作者的健康不利，并且也需要使用灵敏度高的仪器，成本较高。酶联免疫技术应用很普遍，但是其检测的灵敏度不高，无法检测含量低的免疫原。免疫荧光技术也同样存在这样的问题，灵敏度低。另外，自由基检测技术以及金属胶体的免疫分析方法，不仅检测的灵敏度偏低，并且较难对最后形成的复合物进行定量分析。

因此，需要提供一种新的诊断免疫分析方法，该方法检测的灵敏度高，且对最后形成复合物的定量分析更为精准。

发明内容

本发明的一方面提供了一种免疫分析试剂，该试剂由非金属胶体粒子与能够特异性结合所述待分析物质的免疫组分结合形成。

本发明另一方面提供了一种免疫分析方法，该方法采用上述免疫分析试剂来检测样品中的待分析物质的含量，该方法包括如下依次进行的步骤：1)将样品与所述免疫分析试剂接触；2)通过检测待分析物质与所述免疫分析试剂形成的免疫复合物的含量，从而确定待分析物质的含量；所述免疫分析试剂由非金属胶体粒子与能够特异性结合所述待分析物质的免疫组分结合形成。

上述免疫分析试剂及方法，利用标记了非金属胶体粒子的免疫组分特异性结合待分析物质，对最终形成的复合物进行定量分析从而检测出该分析物质的含量。

其中，免疫组分是指能够特异性结合待分析物质的组分。免疫组分与待分析物质之间发生免疫反应而结合，具体的说，样品中的待分析物质与免疫组分特异性结合。优选的，所述的免疫组分为特异性结合蛋白。更优选的，所述的免疫组分选自抗原、半抗原或抗体。

优选的，所述的非金属胶体粒子选自硫、硒、碲胶体粒子。在本发明的一个实施方案中，所述的非金属胶体粒子为水分散形式的硒胶体粒子。

优选的，所述的非金属胶体粒子的平均粒径为3nm～450nm。在本发明的一个实施方案中，所述的硒胶体粒子的平均粒径为11nm～200nm。

在本发明的一个实施方案中，使用的硒胶体粒子为水分散的形式，浓度为0.005％～0.1％(W/V)；浓度优选0.02％～0.04％。在本发明的一个实施方案中，硒胶体粒子的形状大致呈球形，长与宽的比例在0.7～0.95之间。

优选的，非金属胶体粒子与免疫组分的结合方式可以为物理固定、共价键或亲水键结合。

上述的待分析物质可以是抗体、抗原、半抗原。

本发明的免疫分析试剂及方法还可以用来检测分子量较高的大分子物质，例如多肽、蛋白质、抗原、半抗原以及抗体；或激素、维生素、药物、代谢物；或类固醇、维生素。

采用本发明的免疫分析试剂及方法检测液体样品，如尿、血液、血清、唾液及其类似物，可以将样品与免疫分析试剂相混合，经过适当时间的孵育后，检测待分析物质与免疫分析试剂是否形成了免疫复合物或形成的免疫复合物的含量，由此可以获得待分析物质的含量。

免疫复合物的含量可以通过测量光吸收值的方法来检测。测量光吸收值的常规方法有很多，例如本领域技术人员所熟知的分光光度法。在本发明的一个具体实施方式中，采用了固相免疫分析方法，特别适合本发明的非金属胶体粒子免疫分析方法。

本发明的免疫分析试剂和方法并不局限于上述部分中所列举的，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内，例如，可以在上述的免疫分析试剂和方法基础上适当的进行改进，检测多种特异性结合物。

采用本发明的非金属胶体粒子免疫分析试剂和方法，由于其中采用了标记非金属胶体粒子的方式，与现有的免疫分析方法相比，一方面灵敏度更高，能够检测出更低含量的物质，另一方面，最后形成的免疫复合物的检测光吸收值的波长范围更广，在免疫复合物的定量分析上更为精确。

附图说明

附图1为实施例1中所获得免疫复合物的定量分析结果。

具体实施方式

以下结合实施例来进一步阐述本发明的非金属胶体粒子免疫分析试剂和方法。

实施例1

硒胶体粒子的制备