[发明专利]一种对不同产地穿龙薯蓣及同属药材进行质量检测的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药材质量检测的领域，尤其涉及一种对不同产地穿龙薯蓣及同属药材进行质量检测的方法。

背景技术

穿龙薯蓣以根茎入药，其有效成分主要为甾体皂苷类，包括薯蓣皂苷(dioscin)和延龄草苷(trillin)等异螺甾烷醇类皂苷，原薯蓣皂苷(protodioscin)和原纤细皂苷(protogracillin)等呋甾烷醇类皂苷。总皂苷水解产生薯蓣皂苷元(diosgenin，Dio)的平均含量为0.93％～2.26％。水溶性成分被分离出对-羟苄基酒石酸(Piscidicacid)，有较强的镇咳作用。根茎中尚分离出少量2，5-D-螺甾-3，5-二烯(25-D-Spirosta-3，5-diene)，此外，尚含有葡萄糖、鼠李糖、甾醇、尿囊素、树脂、淀粉和蛋白质等成分。

穿龙薯蓣具有消炎、祛痰、平喘、增加冠脉流量、降低血脂、改善心血管功能及抗菌和抗病毒等药理活性，还可减慢心率，增强心肌收缩力，增加每日尿量，改善冠脉循环，降低动脉血压，尤其适用于轻度动脉硬化。主治冠心病、风湿热、风湿关节炎、筋骨麻木、跌打损伤和支气管炎等症。近年来经研究证明，穿龙薯蓣还具有避孕和抗癌等作用，药用价值很高，是国内各大药厂开发新药、特药和中成药的主要原料之一，也是我国传统出口商品。

《中国药典》收载的穿龙薯蓣的鉴别和含量测定项下均是对薯蓣皂苷元的检测，同属其它四种药材均未收载含量测定项，而穿龙薯蓣及同属药材中含有的皂苷种类繁多，结构复杂，虽然制备含量测定用对照品比较困难，但它们都具有相同的基本骨架和官能团，可以借助骨架的通性或官能团的特性，对其进行测定，常采用重量法、比色法、旋光法、库仑法和薄层扫描法，陶莉等采用气相色谱法测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷元的含量、赵景婵等采用正相高效液相色谱测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量、都述虎等采用反相高效液相色谱、二极管阵列检测器测定穿龙总皂苷中薯蓣皂苷元的含量，唐晓清等采用反相高效液相色谱、蒸发光散射检测器测定麦冬中甾体皂苷的含量。但这些定量方法操作繁杂，方法专属性不强，测定准确度不高。

穿龙薯蓣临床应用广泛，有着较好的开发前景。穿龙薯蓣的有效成分主要为甾体皂苷类，而甾体皂苷目前主要是用其苷元作为合成激素类药物的原料，以皂苷的形式作为药用的不多。因此对穿龙薯蓣中含有的活性化合物进行研究将有着重要的应用前景。此外，现有的穿龙薯蓣药材的质量标准比较粗糙，需要建立更完善的质量控制方法。

发明内容

本发明提供了一种对不同产地穿龙薯蓣及同属药材进行质量检测的方法，包括以下步骤，将待测药材粉末按样品溶液制备操作，在一定的色谱条件下测定，以外标法计算各样品中指标的含量，其特征在于选取薯蓣皂苷作为含量测定指标。

其中，样品溶液是将药材粉末用8～10倍量60～70％乙醇超声提取15～40min后，过滤制备得到。优选提取工艺为10倍量65％乙醇超声提取30min，可将药材中薯蓣皂苷提取完全，并且操作简单，重复性好。

样品经溶剂提取后，可以直接进样、正丁醇萃取后进样、乙酸乙酯-正丁醇两步萃取后进样，优选直接进样，操作简单，杂质无干扰，重复性好。

色谱条件为以ODS为固定相，体积比为55∶45的乙腈-水为流动相，检测波长为203nm，流速为1.0mL·min^-1，柱温为35℃，进样量为20μL。

理论塔板数按薯蓣皂苷计算不低于3000；薯蓣皂苷与相邻峰的分离度大于1.5；对称因子按薯蓣皂苷计算均在0.95～1.05之间。

按薯蓣皂苷确定标准曲线方程为：y＝4.139×10⁶x-7.023×10⁴(r＝0.9999)。

本发明提供了另一种对不同产地穿龙薯蓣及同属药材进行质量检测的方法，包括以下步骤，将待测药材粉末按样品溶液制备操作，在一定的色谱条件下测定，以外标法计算各样品中指标的含量，其特征在于选取原薯蓣皂苷作为含量测定指标。

其中，样品溶液是将药材粉末用8～10倍量20～50％乙醇超声提取15～40min后，过滤，乙酸乙酯-正丁醇两步萃取后制备得到。优选10倍量35％乙醇超声提取30min。当以35％乙醇作为提取溶剂时，原薯蓣皂苷提取效率高，干扰峰较少，分离度较好。样品经溶剂提取后，可以直接进样、正丁醇一步萃取后进样、乙酸乙酯-正丁醇两步萃取后进样，优选乙酸乙酯-正丁醇两步萃取后进样，杂质无干扰，重复性好。