[发明专利]一种提取分离夫西地酸的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种从夫西地酸发酵液中分离提取夫西地酸的方法。

背景技术：

夫西地酸(Fusidic Acid，CAS6990-06-3)是一种无色的结晶体，含半个结晶水， 不溶于水，溶于苯、甲醇、乙酸乙酯等有机溶剂，可以从梭链孢酸酯球真菌发酵液中提取分 离出来，该物质是夫西地烷类中最具抗菌活性的化合物，广泛用于治疗严重的葡萄球菌感染， 例如败血病、心内膜炎、骨髓炎、创伤性感染及皮肤感染等疾病。

夫西地酸主要通过发酵法制备，从发酵液提取分离夫西地酸的方法很多，主要有离 子交换法、有机溶剂萃取法等，离子交换法是利用夫西地酸和其它物质在离子交换树脂上交 换或吸附能力的不同，利用离子交换树脂柱，实现夫西地酸和其它物质的分离。虽然离子交 换技术具有优异的分离选择性和很高的浓缩倍数，操作方便，效果突出，提取成本低廉，但 目前的收率和纯度还不能令人满意，需结合其它精制方法才能取得较好的结果。有机溶剂提 取法是利用夫西地酸和其它物质在有机溶剂中分配系数的不同，通过在发酵液中加入特定的 有机溶剂萃取，从而实现夫西地酸和其它物质的分离，该方法使用的有机溶剂通常为乙醚或 各种酯类，工艺也较为简单，但由于大量使用有机溶剂，对溶剂的选择性和再生能力提出了 较高要求，而且这种有毒、易爆、易挥发溶剂的使用，对环境造成了严重污染，给操作也带 来不便。同时有机溶剂价格昂贵，其易挥发的特性也使得工业运行的成本大幅度提高。

中国专利200680049547.4，200810045003.1和国外专利RU1499922C、GB2224649A分 别公开了一些夫西地酸的提取分离的生产方法，因此，夫西地酸的生产方法已经不少，但是， 这些方法运用在工业生产中，都存在不少困难。

发明内容：

本发明的目的是提供一种提取分离夫西地酸的方法，该方法具有生产工艺短、能耗 低、收率高、污染小、成本低等特点。

本发明是通过如下步骤实现的：

1)、超滤提取分离夫西地酸浓缩液：夫西地酸发酵液经过压滤(板框或抽滤)或离 心去除菌体后，超滤去除菌体和大分子杂质、树脂吸附脱除无机盐、真空蒸发浓缩得到夫西 地酸浓缩液；

2)、夫西地酸浓缩液制备夫西地酸结晶体：夫西地酸浓缩液经过溶剂萃取、脱色、 结晶分离、干燥、粉碎、筛分、检验、成品包装等生产步骤得到合格的夫西地酸。

具体步骤如下：

(1)将夫西地酸发酵液经过板框过滤或抽滤或泵入离心机中分离，将分离后的清液 输入贮罐中。

(2)将经过分离菌体后的夫西地酸发酵液清液再经超滤过滤除去残余菌丝体、蛋白 质、糖、色素等生物大分子，并用2～5倍的水洗涤菌渣中残留的夫西地酸，边清洗，边超滤 以获得高的产品收率。超滤所用的膜组件为无机膜组件，主要由1根、3根、7根、19根、 37根多通道、管式、平板式、蜂窝体等膜元件组成，膜材料为截留分子量5000～200000的 陶瓷膜、沸石膜、玻璃膜。

(3)夫西地酸发酵液也可以直接经过超滤过滤除去残余菌丝体、蛋白质、糖、色素 等生物大分子，并用2～5倍的水洗涤菌渣中残留的夫西地酸，边清洗，边超滤以获得高的产 品收率。超滤所用的膜组件为无机膜组件，主要由1根、3根、7根、19根、37根多通道、 管式、平板式、蜂窝体等膜元件组成，膜材料为截留分子量5000～200000的陶瓷膜、沸石膜、 玻璃膜。

(4)将经超滤去杂质所得的夫西地酸发酵液的超滤透析液和残余菌液洗涤水超滤透 析液合并，经过D4020和D312型树脂串联的树脂吸附柱，流速控制在1～10BV／hr，用40％ 乙醇洗脱1～2次，再用15％乙醇洗涤2～3次，收集高含量部分洗脱液。

(5)将夫西地酸洗脱液加入真空旋转蒸发器中，在10～40Kpa、30～60℃条件下减 压蒸发去除乙醇，得到夫西地酸含量大于5000ug／ml夫西地酸浓缩液。

(6)向夫西地酸浓缩液中加入20％～40％的萃取剂，如甲酸乙酯、乙酸乙酯，分离 去除水相，并向有机相中加入1％～3％的活性炭脱色，再经过真空旋转蒸发器脱除萃取剂，得 到含量大于95％的夫西地酸粗品。

(7)将夫西地酸粗品溶解到2～4倍的正己烷中进行两次结晶，再经过离心或抽滤 得到精制的夫西地酸。