[发明专利]电磁辐射诱发Raji细胞癌变的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种电磁辐射致癌性的检测方法，尤其是电磁辐射诱发Raji细胞癌变的检测方法。

背景技术

随着科学技术的飞速发展，电磁技术已经成为工业、医疗、通讯等领域中不可或缺的重要工具之一。电磁技术在方便人们日常生活的同时，对人体的影响也受到越来越多的关注。电磁波可以透入生物体，并与生物组织发生相互作用，导致不同生物层次上的形态、结构及功能发生改变，甚至诱发癌症。如何预防或减少电磁辐射对人体的伤害，已日益成为生命科学、环境科学和医疗卫生领域的研究热点。通过对电磁辐射的生物效应进行深入研究，目前已经提出了多种作用机理的模型、假说和理论。1982年美国政府制订了一套基于热效应的射频辐射标准，用比吸收率(Specific Absorption Rate，SAR，单位为W/kg)值来衡量电磁辐射的热效应，该标准逐渐被全世界所接收并沿用至今。但是，越来越多的现象表明仅仅用SAR值来衡量电磁辐射对人体的影响是不够的，因为长期的电磁辐射给人体造成一系列的健康问题无法用热效应解释和评价。于是，大量研究尝试分析其它一些参数指标来确定电磁辐射的危害。

Leszczynski等人(D.Leszczynski，et al.Differentiation.2002，70：120～129)研究了电磁辐射对人内皮细胞的影响，发现能引起热休克蛋白27(HSP27)的短暂磷酸化，并能激活多种细胞信号转换路径，并提出电磁辐射诱导的HSP27活化能阻止细胞色素C的凋亡路径，从而导致脑瘤的发生。Di carlo等人(A.DiCarlo，et al.J.Cell.Biochem.2002，84：447～454)用功率为3.5mW的电磁辐射对鸡胚胎进行每日30～60分钟的辐射，连续辐射4天，结果发现与对照组相比热休克蛋白70(HSP70)水平下降了27％，从而胚胎防御缺氧应激的能力降低，提示长期暴露于电磁辐射会由于HSP70水平降低而导致细胞自我保护能力降低，从而增加发生肿瘤的可能性。Kramarenko等人(A.V.Kramarenko，et al.Int.J.Neurosci.2003，113：1007～1019)研究了高频电磁辐射对人脑电图的影响，发现用手机照射人脑后，在颞骨部位出现2.5～6.0Hz的慢波，每15～20秒出现一次，持续约1秒；在儿童中有类似的发现，但慢波出现较早、振幅较大、持续时间长且间隔短，表明手机辐射会影响人的大脑，而且可能更容易对儿童大脑造成损伤。然而，并非所有实验都证明电磁辐射会对人体的正常生理指标产生影响。比如在Tahvanainen等人(K.Tahvanainen，et al.Bioelectromagnetics.2004，25：73～83)的研究中，他们用900MHz和1800MHz的手机辐射作用于志愿者35分钟，结果发现动脉血压和心率与对照组没有显著差异。

以上这些研究由于受到实验条件的限制，不能确定长期的电磁辐射所造成的危害及程度，特别是不能对电磁辐射的致癌作用进行评价。由于在实验研究中利用不同的生物学体系，如不同的细胞或动物亚型及生物体处于不同的生理状态等个体差异，或使用不同的辐射装置、实验程序等分析电磁辐射的生物学后果，有的甚至得出相反的结论，从而对确定电磁辐射的致癌作用带来了困难。因此，目前亟需一种可靠的方法来定量地检测电磁辐射的致癌性。

Raji细胞是一种淋巴瘤细胞系，常用于致癌剂和促癌剂的检测。Raji细胞携带Epstein-Barr(EB)病毒基因，EB病毒与许多恶性淋巴瘤和上皮性恶性肿瘤有关，其中尤以与Burkitt淋巴瘤和鼻咽癌的关系最为密切。正常情况下，EB病毒在Raji细胞中处于潜伏状态，不能自发地产生EB病毒增殖后期的抗原和病毒粒子。但当Raji细胞被激活时，EB病毒的早期抗原被激发，其表达会增加。到目前为止，利用Raji细胞的这一特性检测电磁辐射诱发细胞癌变的方法尚未见国内外文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、重复性好的电磁辐射诱发Raji细胞癌变的检测方法。

本发明所提供的一种电磁辐射诱发Raji细胞癌变的检测方法，包括以下步骤：

(1)Raji细胞的培养与传代

将Raji细胞在37℃、5％CO₂培养箱内用RPMI-1640培养液培养并进行传代，RPMI-1640培养液含有10％小牛血清、1％青霉素、1％链霉素、1％谷胺酰胺；

(2)暴露实验