[发明专利]一种高效诱导脐带间充质干细胞分化为类许旺细胞的方法

权利要求书

1.一种高效诱导人脐带间充质干细胞分化为类许旺细胞的方法，其特征是，该方法包括下述步骤：

(1)将脐带间充质干细胞培养至亚融合状态后，弃去旧的培养液，加入含有1mMβ-巯基乙醇培养液诱导过夜；

(2)弃去步骤(1)所述诱导液，用DMEM培养基清洗，加入全反式维甲酸诱导60-84小时；

(3)弃去步骤(2)所述诱导液，用DMEM培养基清洗，加入含有5ng/ml-6ng/ml血小板源生长因子、9-10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、13μM-15μM福司柯林以及250-260ng/ml胶质细胞生长因子或200-210ng/ml神经生长因子的复合诱导液，诱导10-16天，每72小时换一次液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(1)中β-巯基乙醇诱导时间为20-24小时。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(2)和(3)中DMEM培养基清洗2-5次。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(2)中全反式维甲酸的浓度是35ng/ml。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(2)中RA的诱导时间是72小时。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)中血小板源生长因子的浓度是5ng/ml。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)中碱性成纤维细胞生长因子的浓度是10ng/ml。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)中福司柯林的浓度是14μM。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)中胶质细胞生长因子的浓度是252ng/ml。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)中神经生长因子的浓度是200ng/ml。