[发明专利]一种用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列及其应用

权利要求书

1.一种用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列，其特征在于：该引物序列是由序列表中引物cfa2257和wms344的上下游核苷酸序列组成的引物对。

2.根据权利要求1所述的用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列，其特征在于，所述引物cfa2257的上游序列为：5’GATACAATAGGTGCCTCCGC 3’，下游序列为：5’CCATTATGTAAATGCTTCTGTTTGA3’；

所述引物wms344的上游序列为：5’CAAGGAAATAGGCGGTAACT 3’，下游序列为：5’ATTTGAGTCTGAAGTTTGCA 3’。

3.权利要求1或2所述的引物序列在筛选小麦叶锈病基因中的应用。

4.根据权利要求2所述的引物序列在筛选小麦叶锈病基因中的应用，其特征在于：以待测小麦基因组DNA为模板，分别在引物cfa2257和wms344的引导下进行PCR扩增，再对扩增产物进行检测；当用cfa2257扩增的产物有188bp条带，并且用wms344扩增的产物有185bp条带时，则待测小麦含有小麦抗叶锈病基因。

5.根据权利要求4所述的引物序列在筛选小麦叶锈病基因中的应用，其特征在于，所述的PCR扩增：

20μl PCR反应体系为：模板DNA 60ng，Taq酶1U，4μmol·L^-1的上、下游引物各2μL，10mmol·L^-1的dNTP 0.4μL，10×PCR缓冲液2μL，用无菌蒸馏水补充反应体系至20μL；

PCR反应程序为：先94℃5min；然后94℃1min，56℃1min，72℃1min，共35个循环；最后72℃10min，4℃保存。

6.根据权利要求4或5所述的引物序列在筛选小麦叶锈病基因中的应用，其特征在于，所述的对扩增产物进行检测是：对扩增产物在6T％的变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，然后银染显色。