[发明专利]以成熟胚为外植体的君子兰离体快速繁殖方法无效
申请号: | 201010126830.0 | 申请日: | 2010-03-18 |
公开(公告)号: | CN101810141A | 公开(公告)日: | 2010-08-25 |
发明(设计)人: | 王丽;王钦美;邹凡雨 | 申请(专利权)人: | 东北师范大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人: | 刘延军;赵军 |
地址: | 130024 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 成熟 外植体 君子兰 快速 繁殖 方法 | ||
1.以成熟胚为外植体的君子兰离体快速繁殖方法,其特征是具体步骤如下:
1).外植体脱毒、接种及愈伤诱导:取成熟果实中的胚,放入无菌超净台中,用75%(体积/体积)酒精浸泡30~60秒,用0.1~0.2%(质量/体积)的升汞溶液浸泡2~5分钟,无菌水冲洗3~5遍,将裸胚上黄色致密的长度2mm的一端切下,接种在含2,4-D 2~4mg/L、蔗糖3~4%(质量/体积)、琼脂0.45~0.7%(质量/体积)的MS培养基上,20~30℃每天40W日光灯照射8~9小时,40~50天继代一次,待黄色愈伤或者绿色膨大组织长到直径5mm时即诱导分化;
2).不定芽的诱导:将生长状态良好的黄色愈伤或绿色膨大组织转接到诱导分化培养基:MS+KT 0.25~0.5mg/L+2,4-D 0.75~1.5mg/L+3~4%(质量/体积)蔗糖+0.45~0.7%(质量/体积)琼脂,40~50天继代一次,20~30℃每天光照8~12小时;30~40天见再生芽产生,继代4个月时从一块愈伤分化出200多株再生芽苗;
3).根的诱导:再生植株转到1/2MS+NAA 1~2mg/L+蔗糖2%(质量/体积)+琼脂0.45~0.7%(质量/体积)的生根培养基上,20~30℃每天10小时光照;
4).再生植株移栽:植株生根后即可移栽,腐殖土121℃灭菌30~60分钟,移栽前将植株上的琼脂及杂物冲洗干净,7天浇一次透水便成活。
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