[发明专利]一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法

权利要求书

1.一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法，该胶囊由鸡矢藤、毛大丁草、虎杖和阴地蕨组成，其特征在于：

a、取胶囊颗粒的内容物2g，加乙醇20ml，回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水2ml，滤过，滤液用正丁醇10ml萃取，分取正丁醇液，蒸去正丁醇，加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液；

另取鸡矢藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；

吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶甲酸＝85∶15∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛∶浓硫酸∶冰乙酸＝0.5∶1∶50试液，于105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b、取胶囊颗粒的内容物2g，加95％乙醇30ml超声处理45分钟，滤过，滤液挥干，残渣加10ml水溶解，用10ml正丁醇萃取3次，萃取液挥去正丁醇，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；

另取毛大丁草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；

吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲醇∶水＝10∶1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以15％磷钼酸乙醇试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c、取胶囊颗粒的内容物2g，加甲醇20ml超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液5ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；

另取虎杖对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；

吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下于365nm检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.根据权利要求1所述一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法，其特征在于：采用高效液相色谱法对虎杖中的大黄素和虎杖苷进行定量鉴别。

3.根据权利要求2所述一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法，其特征在于：在定量鉴别虎杖中的大黄素和虎杖苷时，每粒含虎杖以大黄素计，不得少于0.30mg；每粒含虎杖以虎杖苷计，不得少于0.25mg。

4.根据权利要求2所述一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法，其特征在于：

a、取胶囊颗粒的内容物，研细，精密称取约0.5g，置具塞三角烧瓶中，精密加入乙醇20ml，超声处理1小时，放冷，滤过，残渣用乙醇分三次洗涤，每次10ml，合并滤液与洗液于50ml烧瓶中，挥去乙醇，加稀盐酸10ml溶解后，再加氯仿20ml，置于70℃的水浴中水解30分钟，冷却，移置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤烧瓶，并入分液漏斗中，分取氯仿层，酸液用氯仿洗涤2次，每次10ml，合并氯仿液，挥去氯仿，残渣精密加乙醇20ml，称定重量，置水浴中微热溶解残渣，放冷后，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

另取大黄素对照品精密称定后加甲醇制成每1ml含0.03mg的对照品溶液；

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，即测定得每粒含虎杖以大黄素计的含量；

b、取胶囊颗粒的内容物，精密称定0.3g，精密加入50％乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，冷却至室温，再称定重量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，即得供试品溶液；

精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的虎杖苷对照品后加50％乙醇制成每1ml含20μg的对照品溶液；

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，即测定得每粒含虎杖以虎杖苷计的含量。

5.根据权利要求4所述一种治疗痔疮胶囊药物成分的鉴别方法，其特征在于：

a、液相色谱仪测定条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1％磷酸为流动相；检测波长为288nm；理论板数以大黄素峰计算应不低于5000；

b、液相色谱仪测定条件为：用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水为流动相；检测波长为306nm；理论塔板数按虎杖苷峰计应不低于4000。