[发明专利]蛋白质氧化复性新方法无效
申请号: | 201010132073.8 | 申请日: | 2010-03-25 |
公开(公告)号: | CN102199187A | 公开(公告)日: | 2011-09-28 |
发明(设计)人: | 王楠;芦娜;吕春婉 | 申请(专利权)人: | 威志兰斯医学科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C07K1/00 | 分类号: | C07K1/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100149 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 氧化 复性 新方法 | ||
1.一个生产活性蛋白的工艺流程,包括将变性蛋白与色谱基质接触和/或吸附,完全或部分去除变性剂和/或其它杂质,使变性蛋白迅速形成近天然结构的稳定中间体形态,采用氧化剂处理,促进蛋白分子内正确二硫键的形成,获得活性产物。
2.权利要求1所述的活性蛋白,特征在于该蛋白在活性状态下,含有1个或以上的分子内二硫键。
3.权利要求1所述的变性蛋白,特征在于该蛋白可先经还原处理,基本去除了分子内二硫键的错误连接。
4.权利要求1所述的色谱基质,特征在于在合适的条件下,该基质能够与变性蛋白接触和/或吸附;并在合适的条件下,能够使目的蛋白与变性溶液中的变性剂和/或其它杂质分离或部分分离;且在合适的条件下,能够使复性的目的蛋白脱离该基质。
5.权利要求1所述的氧化剂,特征在于能够氧化蛋白分子的游离巯基,并促进二硫键的形成。
6.权利要求5所述的氧化剂,是氧化型DTT(DTTox)。
7.权利要求5所述的氧化剂,是氧化型谷胱苷肽GSSG。
8.权利要求5所述的氧化剂,是胱氨酸cysteamine。
9.权利要求1所述的氧化剂处理,是在形成的稳定中间体与基质接触和/或吸附状态下进行。
10.权利要求1所述的氧化剂处理,是在形成的稳定中间体脱离基质后的溶液内进行。
11.权利要求1所述的氧化剂处理,是在偏酸性、中性或偏碱性环境中进行。
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